Informācija

Kā novērst HL-60 šūnu piesārņojumu?

Kā novērst HL-60 šūnu piesārņojumu?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Esmu divas reizes atkausējis Hl-60 šūnas no šķidrā slāpekļa kameras RPMI 1640 barotnē (satur 10% FBS, L glutamīnu, penicilīnu/streptomicīnu). Pirmajā dienā šūnas paliek kārtībā. Bet, subkultivējot no pirmās kolbas uz jaunām kolbām (šūnu šķīdums: barotne = 1:3), visas kolbas kļuva piesārņotas 2. kultivēšanas dienā. Abos laikos tika atrasts mākonis. Var minēt, ka augšanai izmantoju sterilas vienreiz lietojamas pipetes un nepārklātu kolbu. Visas pārvietošanas uz citām kolbām un barotnes pievienošanas tika veiktas ļoti rūpīgi un tika veiktas tīrā stendā. Pirms tīra stenda izmantošanas tas tika izsmidzināts ar 70% EtOH.

Vai kāds ir saskāries ar šādu problēmu? Lūdzu, dalieties un, ja ir, lūdzu, sniedziet dažus vērtīgus ieteikumus vai atsauces.

Paldies


Vienīgais visticamākais piesārņojuma iemesls ir tas, ka jūsu saldētie krājumi ir piesārņoti. Pieņemot, ka esat pareizi apmācīts šūnu kultūrā, strādājat pareizi uzturētā bioloģiskās drošības kabinetā, visi jūsu reaģenti ir sterili (vai barotne ir sterili filtrēta pēc FBS pievienošanas utt.) un inkubators ir tīrs. (ūdens vannas panna ir autoklāvēta, pievienots sterils ūdens ar biocīdu/fungicīdu, viss inkubators noslaucīts un visas noņemamās daļas periodiski autoklāvētas utt.), tad krājuma piesārņojums ir vissaprātīgākā atbilde. Mēģiniet atkausēt agrākus fragmentus, ar kuriem strādājāt, vai pasūtiet jaunu flakonu vai divus no ATCC vai jebkura cita jūsu mobilo sakaru pārdevēja. Pārliecinieties, vai pipetes ir tīras un vai izmantojat sterilus filtrētus pipešu uzgaļus.


Izvairieties izlaist rokas caur kolbu/mēģenes atverēm, jo ​​ādas izcelsmes baktērijas ir galvenais piesārņojuma avots. Pirms atvēršanas vai aizvākošanas ir droši uz īsu brīdi nodedzināt vāciņus un tūbiņu atvēršanu. Ja jūs ievērojāt labas aseptikas metodes, izmantojot atkausēšanu un subkultūras, iespējams, ka sasaldētās šūnas iepriekš bija piesārņotas. Mēģiniet atkausēt jaunu sasaldētu šūnu flakonu un pārbaudiet, vai ir uzlabojumi.


Šīm "mākoņainajām" kultūrām ir vienkāršs iemesls. HL-60 ir suspensijas šūnu līnija (par to skatīt ATCC), tāpēc lielākā daļa šūnu paliek šķidrā fāzē un nelīp pie kultivēšanas kolbas plastmasas virsmas. Daži var, bet parasti tie nelīp ļoti labi un nokrīt, pārvietojot kolbu vai viegli piesitot tai.

Suspensijas kultūras izskatās savādāk nekā baktēriju piesārņojums, tās ir mazāk blīvas, un, skatoties uz kultūru, mikroskopā var redzēt šūnas (kas ir daudz lielākas par baktērijām). Baktēriju kultūras bieži uzkrāj baktēriju nogulsnes pie barotnes robežas. Un baktēriju piesārņoto kultūru barotnes gandrīz vienmēr ir dzeltenas, jo vielmaiņas produkti padara barotni skābu. Šeit noderētu attēls.


Laboratorijas piesārņojums: piesārņojuma novēršana

Šīs laboratorijas piesārņojuma sērijas otrajā daļā Thermo Fisher Scientific eksperti piedāvā savus labākos padomus par laboratorijas piesārņojuma novēršanu.

Otrā daļa, ko prezentēja Mērija Keja Beitsa, globālās šūnu kultūras speciāliste un Duglass Vernerspahs, Thermo Fisher Scientific biznesa direktors, saucas: Padomi piesārņojuma novēršanai.

Šīs sērijas pirmajā daļā mēs apspriedām bioloģisko piesārņotāju veidus un uzzinājām, ka laboratorijas darbinieki un procedūras kļūdas var būt vislielākie piesārņojuma avoti, bet ko mēs varam darīt ar to?

“Piesārņojums visbiežāk rodas procedūru kļūdu dēļ, no kurām iespējams izvairīties

Mūsdienu laboratorijas ir noslogota vide, kurā personāls koplieto aprīkojumu dažādās darbstacijās, kuras var atrasties intensīvas satiksmes zonu un noslogotu instrumentu tuvumā.

Lai saglabātu šūnu kultūru tīrību, kā arī drošu laboratorijas vidi, ir ļoti svarīgi ievērot labu aseptisko tehniku.

Dažas no visvienkāršākajām laboratorijas procedūrām ir vissvarīgākās, tostarp pareizas aseptikas tehnikas izmantošana, tīru laboratorijas mēteļu nēsāšana un roku mazgāšana, lai samazinātu mikroorganismu iekļūšanas risku zīdītāju šūnu kultūrās.

Tālāk mēs apspriežam citus paņēmienus, kas nav tik vienkārši – labs laboratorijas dizains, konsekventas kultivēšanas procedūras ar regulāru identitātes pārbaudi, lai dokumentētu šūnu līniju autentiskumu, un tīrīšanas režīmi.

Šīs procedūras pašlaik var nesaņemt pelnīto uzmanību.

Katrā laboratorijā ir jābūt speciālai šūnu kultūras zonai, kas ir nošķirta no laboratorijas zonām ar lielu satiksmi.

Tikai būtiskam personālam jābūt tiešai piekļuvei šūnu kultūras zonai. Rūpīgi jāapsver arī ūdens un HVAC iekārtu izvietojums.

Piemēram, tā kā krāna ūdens var būt mikrobu piesārņojuma avots, izlietnēm un ūdens vannām jāatrodas pietiekami tālu, lai izvairītos no izšļakstīšanās uz sterilām darbstacijām.

Turklāt HVAC iekārtu gaisa difuzorus nevajadzētu uzstādīt tieši virs inkubatoriem, jo ​​pelējuma sporas un citi piesārņotāji var tikt iepūsti darba telpā.

Mazajām laboratorijām ir jābūt īpaši uzmanīgām attiecībā uz laboratorijas dizainu, jo, tām augot un ieviešot jaunus instrumentus, laboratorijas izkārtojums var kļūt neaizsargātāks pret piesārņojumu.

Kultivēšanas procedūras

Labas aseptiskās tehnikas praktizēšana palīdzēs virzīt pētniecību no pirmās pasāžas procedūras līdz genoma analīzei, lai saprastu, kas izraisa slimību.

Pirmais solis aseptiskā kultivēšanas procedūrā ir novērst savstarpēju piesārņojumu, vienlaikus strādājot tikai ar vienu šūnu līniju.

Bieži notiek nejauša šūnu līniju maiņa un savstarpēja kontaminācija starp kultūrām, kas var izraisīt kļūdainus vai maldinošus datus.

Bioloģiskās drošības kabineti (BSC) un darba zonas ir stingri jātīra un jādezinficē starp kultivēšanas sesijām.

Uzlabotiem protokoliem mūsdienu šūnu kultūras laboratorijā ir nepieciešama bieža pārbaude.

Mikoplazmas pārbaudi ieteicams veikt reizi mēnesī. Lai izvairītos no savstarpējas inficēšanās un šūnu līniju sajaukšanas, vienlaikus strādājiet tikai ar vienu šūnu tipu.

Visbeidzot, izvairieties no regulārām antibiotikām šūnu kultūras barotnēs, jo antibiotikas var maskēt pamatā esošo piesārņojumu, kas nav antibiotiku mērķis.

Tīrā, labi organizētā laboratorijā, kurā ir vairāki lietotāji ar atšķirīgu pieredzes līmeni, ir arī jāizmanto laba pipetēšanas prakse (GPP), lai nodrošinātu gan precizitāti, gan paraugu drošību.

Pirmais solis ir nodrošināt, lai laboratorijas darbinieki nejauši nepieskartos pipetes uzgalim nesteriliem materiāliem un virsmām.

Ja rodas šāda kļūda, šis uzgalis ir jāizmet.

Pēc tam šūnu kultūras procesiem, sākot no augšanas un iziešanas cauri analīzei, ir nepieciešamas drošas pipetēšanas sistēmas ar precīzu reproducējamību.

Thermo Scientific F1-ClipTip pipetēšanas sistēma neļauj pipetes uzgalim nokrist lietošanas laikā.

Droša aizzīmogošana katram paraugam ar precīzu parauga tilpumu padara ClipTip par nenovērtējamu rīku, lai paātrinātu atrašanu.

Augstas kvalitātes palīgmateriālu, barotņu un reaģentu izmantošana no cienījamiem ražotājiem ir vienkāršs veids, kā nodrošināt konsekventu darbību laboratorijā.

Palīgmateriāliem un steriliem konteineriem jābūt izgatavotiem no sveķiem, kas nesatur piedevas, kas varētu iekļūt paraugos vai reaģentos un negatīvi ietekmēt pētījumu rezultātus.

Tīrīšanas procedūras

Lai uzturētu drošas un sterilas darba virsmas, ir jāievieš standarta darbības procedūra iekārtu, darba virsmu un ārpus darba virsmu pareizai apkopei, tīrīšanai un dezinfekcijai.

Laboratorijas tīrīšanā jāiekļauj visas augstas plakanas virsmas, piemēram, ledusskapju, saldētavu un inkubatoru virsmas, kas var savākt putekļus un citus iespējamos piesārņotājus.

Līdzīgi kā glabātuve aizsargā jūsu vērtslietas, šūnu līniju aizsardzība sākas ar uzticamu BSC.

Izvēlieties BSC, kas nodrošinās drošu gaisa filtrēšanu un novērsīs parauga piesārņojumu, kas ir paredzēti lietotāja vienkāršībai un parauga drošībai.

Kultūras barotnes drīkst atvērt tikai BSC, un laboratorijas personālam jāizvairās no nekārtības BSC darbvietā.

Izmantojiet maigas roku kustības, lai darba laikā samazinātu tīrā gaisa plūsmas traucējumus.

Sertificētam speciālistam katru gadu jāpārbauda filtra un gaisa plūsmas integritāte. Iekšējās virsmas jātīra un jādezinficē pēc katras darba sesijas, un visas virsmas, ieskaitot paplāti zem darba virsmas, katru mēnesi jātīra un jādezinficē ar 70% etanolu vai citu piemērotu dezinfekcijas līdzekli.

Turklāt procedūras ir jāoptimizē, lai samazinātu to reižu skaitu, kad lietotājs, manipulējot ar paraugiem, noņem rokas un rokas no BSC darba zonas.

Darbs jāplāno tā, lai BSC varētu ielādēt procedūrām nepieciešamos paraugus un materiālus un pēc tam izvest atkritumus un sakopt pēc procedūras.

Procedūras laikā BSC operatoram ir jāstrādā tikai ar priekšmetiem, kas jau atrodas BSC darba zonā. Jāievēro regulāras tīrīšanas procedūras, un noplūdes nekavējoties jānotīra.

Mūsdienu jaunajām procedūrām un inovatīviem protokoliem ir nepieciešams CO2 inkubators ar uzlabotām funkcijām, kas palīdz novērst piesārņotāju iekļūšanu inkubatorā vai kultūru iebrukumu, tiklīdz tas ir iekšā.

Izpratne par CO2 inkubatoru pamatīpašībām un pārbaudes prasībām veiksmīgai eksperimentēšanai ir svarīga, lai pieņemtu pārdomātu lēmumu, iegādājoties inkubatoru.

Tā kā mikroorganismi ir mūsu pastāvīgie pavadoņi un tie var iekļūt jebkurā inkubatorā katru reizi, kad durvis tiek atvērtas, ieguldījumi jaunākās tehnoloģijas inkubatora dizainā ir obligāti, lai cīnītos pret šūnu kultūru piesārņojumu.

Meklējiet inkubatoru, kas darbojas kopā ar jums, lai kontrolētu un apkarotu piesārņojumu.

Piemēram, Thermo Scientific Forma inkubators var piedāvāt HEPA filtrēšanu, kas ik pēc 60 sekundēm attīra visu kameras gaisa tilpumu, lai piecu minūšu laikā pēc katras durvju atvēršanas izveidotu ISO 5 tīras telpas apstākļus.

Šī funkcija ir pieejama vai nu ūdens apvalkā, vai tiešā siltuma formātā. Tiešie siltuma inkubatori var piedāvāt papildu aizsardzību ar automatizētu augstas temperatūras ciklu, kas ietaupa laiku, novēršot nepieciešamību autoklāvāt iekšējās daļas.

Thermo Scientific Heracell CO2 inkubators nodrošina 100% tīra vara iekšējo kameru un daļas, kā arī augstas temperatūras dekontamināciju.

Šodien ir pieejamas arī uzlabotas, precīzas mikroprocesoru funkcijas CO2 sensoriem, mitruma kontrole un iebūvēta datu uzraudzība, kas ļauj pētniekiem veikt vislabāko darbu bez problēmām.

Galvenās inkubatora funkcijas ir:

  • Viegli tīrāmas virsmas
  • Vara iekšējās kameras
  • Laba gaisa filtrēšana - HEPA filtri
  • Automatizēts augstas temperatūras dezinfekcijas cikls
  • Masīvstikla, dalītas, gāzi necaurlaidīgas iekšdurvis
  • Ārējais ūdens avots
  • Datu reģistrēšana un skārienekrāna vadīklas
  • Uzlaboti CO2 un O2 sensori

Piesārņojums visbiežāk rodas procedūru kļūdu dēļ, no kurām iespējams izvairīties.

Bez labas aseptiskās prakses un konsekventi piemērotām šūnu kultūras pārvaldības procedūrām hroniskas piesārņojuma problēmas ir lielāka iespējamība.

Pareizi pārvaldīta laboratorija nodrošinās pētniekiem vidi, kas samazina negadījumu un kļūdu iespējamību un nodrošina konsekventāku un uzticamāku veiktspēju.

Trešajā un pēdējā sērijas daļā būs noderīgi padomi, kā izvēlēties membrānas un filtrēšanas līdzekli.


Koronavīrusa izplatības novēršana

Jūs esat apguvis pamatprincipus: nēsājat masku, kad nepieciešams, izvairāties no pūļa un ievērojat distanci. Bet jums, iespējams, joprojām ir jautājumi. Vai maskas nēsāšana aizsargā jūs, citus vai abus? Kā tieši fiziskā distancēšanās palīdzēs? Un kas jums jāzina par jaunajām Covid-19 vakcīnām?

Apmeklējiet mūsu koronavīrusu resursu centru, lai iegūtu plašāku informāciju par koronavīrusu un COVID-19.

Ko es varu darīt, lai pasargātu sevi un citus no COVID-19?

Sekojošās darbības palīdz novērst COVID-19, kā arī citu koronavīrusu un gripas izplatību.

Ja neesat pilnībā vakcinēts pret COVID-19:

  • Valkājiet sejas masku, kā ieteicis CDC.
  • Saglabājiet vismaz sešu pēdu attālumu starp sevi un citiem.
  • Izvairieties no lielām pulcēšanās vietām.
  • Socializējies brīvā dabā.
  • Vakcinējieties, tiklīdz esat tiesīgs.
  • Izvairieties no cieša kontakta ar slimiem cilvēkiem.
  • Samaziniet pieskaršanos acīm, degunam un mutei.
  • Palieciet mājās, kad esat slims.
  • Nosedziet klepu vai šķaudīt ar salveti, pēc tam izmetiet salveti miskastē.
  • Regulāri notīriet priekšmetus un virsmas, kam bieži pieskaras.
  • Bieži mazgājiet rokas ar ziepēm un ūdeni.

Šī diagramma parāda, kā tādi aizsardzības pasākumi kā ceļošanas ierobežošana, izvairīšanās no pūļa, sociālā distancēšanās un rūpīga un bieža roku mazgāšana var palēnināt jaunu Covid-19 gadījumu attīstību un samazināt veselības aprūpes sistēmas pārslodzes risku.

Kādas aktivitātes brīvā dabā un iekštelpās tiek uzskatītas par drošām? Vai ir svarīgi, vai esmu vakcinēts? Un vai man joprojām ir jāvalkā maska?

Saskaņā ar CDC jaunajām vadlīnijām pilnībā vakcinēti cilvēki tagad var piedalīties visās iekštelpu un āra aktivitātēs bez maskas un bez fiziskas distancēšanās. Cilvēkiem, kuri nav pilnībā vakcinēti, CDC turpina ieteikt masku nēsāšanu un citus profilaktiskus pasākumus dažos āra apstākļos un lielākajā daļā iekštelpu.

Ja jums ir novājināta imūnsistēma veselības stāvokļa vai medikamentu dēļ, ko lietojat, vakcīna var būt mazāk aizsargāta un tādējādi paaugstināts risks, ja esat blakus citiem, kas nav vakcinēti. Konsultējieties ar savu ārstu, lai noskaidrotu, kādi drošības pasākumi jums jāturpina veikt.

Neatkarīgi no tā, vai esat vakcinēts vai nē, jums ir jāievēro federālie, štata, cilšu un vietējie likumi, kā arī darba vietas vai uzņēmuma prasības attiecībā uz masku nēsāšanu un fizisko distancēšanos.

CDC ir izveidojis noderīgu diagrammu, kas ilustrē aizsardzību, ko nodrošina vakcinācija visās āra un iekštelpu aktivitātēs un kādi profilakses pasākumi jums joprojām ir jāveic, ja neesat vakcinēts. Lai skatītu diagrammu, noklikšķiniet šeit.

Kas man jāzina par efektīvu roku mazgāšanu?

Bieži mazgājiet rokas ar ziepēm un ūdeni vismaz 20 sekundes, īpaši pēc tualetes apmeklējuma pirms ēšanas pēc deguna izpūšanas, klepošanas vai šķaudīšanas un pēc tam, kad esat rīkojies ar jebko, kas nāk no jūsu mājas.

  • Ja ziepes un ūdens nav viegli pieejami, izmantojiet spirtu saturošu roku dezinfekcijas līdzekli ar vismaz 60% spirta, pārklājot visas roku virsmas un berzējot tās kopā, līdz tās jūtas sausas.
  • Vienmēr mazgājiet rokas ar ziepēm un ūdeni, ja rokas ir redzami netīras.
  • CDC roku mazgāšanas vietnē ir detalizēti norādījumi un video par efektīvām roku mazgāšanas procedūrām.

Kā izplatās koronavīruss?

Koronavīruss izplatās galvenokārt no cilvēka uz cilvēku. Persona, kas ir inficēta ar koronavīrusu un pat bez simptomiem, runājot vai elpojot, var izdalīt aerosolus. Aerosoli ir infekciozas vīrusu daļiņas, kas var peldēt vai dreifēt gaisā līdz pat trim stundām. Cits cilvēks var ieelpot šos aerosolus un inficēties ar koronavīrusu.

Tas var notikt starp cilvēkiem, kuri ir ciešā kontaktā viens ar otru. Pilieni, kas rodas, inficētai personai klepojot vai šķaudot, var nonākt tuvumā esošo cilvēku mutē vai degunā vai, iespējams, tikt ieelpoti viņu plaušās.

Pārnešanas iespējamība ir mazāka ārpus telpām, kur gaisa straumes izkliedē un atšķaida vīrusu, nekā mājās, birojā vai citā ierobežotā telpā ar ierobežotu gaisa cirkulāciju. Pat ārpus telpām cilvēkiem, kuri nav pilnībā vakcinēti, jāievēro CDC norādījumi par maskēšanu un fizisko distancēšanos, lai vēl vairāk samazinātu risku.

Izplatīšanās risks saskarē ar piesārņotām virsmām vai priekšmetiem tiek uzskatīts par ārkārtīgi zemu. Saskaņā ar CDC, katram kontaktam ar piesārņotu virsmu ir mazāka nekā 1 no 10 000 iespējamība izraisīt infekciju.

Vīruss var izdalīties siekalās, spermā un izkārnījumos, vai tas izdalās maksts šķidrumos, nav zināms. Skūpstīšanās var pārnēsāt vīrusu. Pašlaik šķiet, ka vīrusa pārnešana ar fekālijām vai vaginālā vai anālā dzimumakta vai orālā seksa laikā ir ārkārtīgi maz ticama.

Kā kontaktpersonu izsekošana varētu palīdzēt palēnināt COVID-19 izplatību?

Ikvienam, kurš nonāk ciešā kontaktā ar kādu, kam ir COVID-19, ir paaugstināts risks inficēties pašam un potenciāli inficēt citus. Kontaktu izsekošana var palīdzēt novērst turpmāku vīrusa pārnešanu, ātri identificējot un informējot cilvēkus, kuri var būt inficēti un lipīgi, lai viņi varētu veikt pasākumus, lai neinficētu citus.

Kontaktpersonu izsekošana sākas, identificējot visus, ar kuriem persona, kurai nesen diagnosticēts Covid-19, ir bijusi kontaktā kopš inficēšanās. Covid-19 gadījumā cilvēks var būt lipīgs 48 līdz 72 stundas pirms simptomu parādīšanās.

Kontaktpersonas tiek informētas par viņu iedarbību. Viņiem var pastāstīt, kādiem simptomiem jāpievērš uzmanība, ieteikt kādu laiku izolēt sevi un pēc vajadzības meklēt medicīnisko palīdzību, ja viņiem sāk parādīties simptomi.

Kas ir fiziskā distancēšanās un kāpēc tā ir svarīga?

Covid-19 vīruss galvenokārt izplatās, vienam cilvēkam ieelpojot pilienus vai aerosolus, kas veidojas, inficētajai personai klepojot, šķaudot, runājot vai elpojot.

Fiziskā distancēšanās attiecas uz darbībām, kas veiktas, lai apturētu vai palēninātu lipīgas slimības izplatīšanos. Personai tas attiecas uz pietiekama attāluma (6 pēdas vai vairāk) saglabāšanu starp sevi un citu personu, lai izvairītos no inficēšanās vai citas personas inficēšanas. Norādījumi par darbu no mājām un sanāksmju un lielāku pasākumu atcelšana palīdz īstenot fizisku distancēšanos kopienas līmenī.

Ko man nozīmē CDC jaunā "tuvu kontaktu" definīcija?

CDC ir paplašinājis veidu, kā definē ciešus kontaktus ar Covid-19 inficētu personu. Līdz šim brīdim CDC bija definējis ciešu kontaktu kā personu, kas pavadīja 15 vai vairāk pēc kārtas minūtes sešu pēdu rādiusā no cilvēka, kuram ir COVID-19. Saskaņā ar jauno definīciju ciešs kontakts ir cilvēks, kurš pavada 15 minūtes vai vairāk sešu pēdu rādiusā no cilvēka ar Covid-19. 24 stundu laikā.

Tuviem kontaktiem ir paaugstināts infekcijas risks. Ja cilvēkam ir pozitīvs COVID-19 tests, kontaktu izsekotāji var identificēt viņu ciešos kontaktus un mudināt viņus ievietot karantīnā, lai novērstu turpmāku izplatīšanos. Pamatojoties uz jauno definīciju, vairāk cilvēku tagad tiks uzskatīti par ciešiem kontaktiem.

Daudzi faktori var ietekmēt iespēju, ka infekcija izplatīsies no vienas personas uz otru. Šie faktori ietver to, vai viens vai abi cilvēki valkā maskas, vai inficētā persona klepo vai viņam ir citi simptomi un vai tikšanās notika telpās vai ārā. Lai gan noteikums "15 minūtes sešu pēdu attālumā" ir noderīgs norādījums, vienmēr vislabāk ir samazināt ciešu mijiedarbību ar cilvēkiem, kas nav jūsu mājsaimniecības locekļi.

CDC jauno definīciju ietekmēja gadījums, kas aprakstīts CDC Saslimstības un mirstības nedēļas ziņojums kurā tiek uzskatīts, ka korekcijas dienesta darbinieks Vērmontā ir inficējies pēc tam, kad 17 nav secīgi minūtes sešām asimptomātiskām personām, kurām visiem vēlāk bija pozitīvs COVID-19 tests.

Kāda veida medikamentiem un veselības piederumiem man vajadzētu būt pa rokai, lai ilgstoši uzturētos mājās?

Mēģiniet uzkrāt vismaz 30 dienu nepieciešamās receptes. Ja jūsu apdrošināšana atļauj uzpildīšanu 90 dienu laikā, tas ir vēl labāk. Pārliecinieties, ka jums pa rokai ir arī bezrecepšu medikamenti un citi veselības piederumi.

Medicīnas un veselības piederumi:

  • recepšu medikamenti
  • izrakstītās medicīniskās preces, piemēram, glikozes un asinsspiediena kontroles iekārtas
  • drudža un sāpju zāles, piemēram, acetaminofēns
  • klepus un saaukstēšanās zāles
  • pretcaurejas zāles
  • termometrs
  • šķidrumi ar elektrolītiem
  • ziepes un spirta bāzes roku dezinfekcijas līdzeklis
  • salvetes, tualetes papīrs, vienreizējās lietošanas autiņi, tamponi, higiēniskās paketes
  • atkritumu maisi.

Kādus piesardzības pasākumus es varu veikt, iepērkoties pārtikas preču veikalos?

Koronavīruss, kas izraisa COVID-19, galvenokārt tiek pārnests ar vīrusu saturošām pilieniņām vai ar vīrusu daļiņām, kas peld gaisā. Vīrusu var tieši ieelpot, un tas var izplatīties arī tad, kad cilvēks pieskaras virsmai vai objektam, uz kura atrodas vīruss, un pēc tam pieskaras savai mutei, degunam vai acīm. Pašlaik nav pierādījumu, ka Covid-19 vīruss tiek pārnests ar pārtiku.

Drošības pasākumi palīdz izvairīties no koronavīrusa ieelpošanas vai pieskaršanās piesārņotai virsmai un sejai.

Pārtikas veikalā ievērojiet vismaz sešu pēdu attālumu starp sevi un citiem pircējiem. Bieži pieskaramās virsmas, piemēram, pārtikas preču ratiņus vai grozu rokturus, noslaukiet ar dezinfekcijas salvetēm. Izvairieties pieskarties sejai. Auduma maskas nēsāšana palīdz atgādināt, ka nedrīkst pieskarties sejai, un var vēl vairāk palīdzēt samazināt vīrusa izplatību. Pirms iziešanas no veikala izmantojiet roku dezinfekcijas līdzekli. Nomazgājiet rokas, tiklīdz esat mājās.

Ja esat vecāks par 65 gadiem vai kāda iemesla dēļ pakļauts paaugstinātam riskam un vēl neesat vakcinēts, ierobežojiet braucienus uz pārtikas preču veikalu. Palūdziet kaimiņam vai draugam paņemt pārtikas preces un atstāt tās ārpus jūsu mājas. Skatiet, vai jūsu pārtikas preču veikals piedāvā īpašu darbalaiku gados vecākiem pieaugušajiem vai tiem, kam ir pamata slimības. Vai arī piegādājiet pārtikas preces uz mājām.

Kādi piesardzības pasākumi joprojām ir nepieciešami, ja neesat pilnībā imunizēts ar Covid-19 vakcīnu?

Valkājiet maskas, kā ieteicis CDC. Fiziskā distance. Socializējies brīvā dabā. Izvairieties no pārpildītām iekštelpu telpām. Bieži mazgājiet rokas. Ja neesat pilnībā vakcinēts, šie ir būtiski piesardzības pasākumi, kas jums jāveic, lai samazinātu risku saslimt ar koronavīrusu vai izplatīt to.

Bet kā ir ar citiem piesardzības pasākumiem, ko jūs varētu veikt? Vai viņi palīdz, vai ir pareizi viņus ļaut? Paskatīsimies.

Veicot uzdevumus, jums nav jāvalkā cimdi. Tā ir taisnība, ka cilvēks var inficēties, ja viņš pieskaras virsmai vai objektam, uz kura ir vīrusu daļiņas, un pēc tam pieskaras savai mutei, degunam vai acīm. Bet tas nav galvenais vīrusa izplatīšanās veids. Turklāt cimdi nenovērsīs šāda veida transmisiju un pat var palielināt iespēju, ka jūs pieskarsities savai sejai. Tā vietā nomazgājiet rokas pirms iziešanas no mājas, izmantojiet roku dezinfekcijas līdzekli, kad atrodaties ārpus mājas, un vēlreiz nomazgājiet rokas, kad atgriezīsities mājās. Starplaikos mēģiniet nepieskarties sejai.

Jums nav jādezinficē pārtikas preces vai līdzņemšanas konteineri. Inficēšanās risks no pārtikas vai pārtikas iepakojuma ir ļoti mazs. CDC iesaka neizmantot dezinfekcijas līdzekli, kas paredzēts kartona vai citu pārtikas preču cietām virsmām, kas var absorbēt ķīmiskās vielas. Ja raizējaties par līdzņemšanu, pārlieciet ēdienu uz saviem servēšanas traukiem. Nomazgājiet rokas un dezinficējiet letes pēc pārtikas preču nolikšanas vai izņemšanas konteineru apstrādes.

Jūsu pasts var iznākt no karantīnas. Pasts nerada lielu risku, un pasts jāatliek malā vairākas dienas pirms tā atvēršanas. Atkal vislabāk ir nomazgāt rokas pēc tam, kad esat strādājis ar visu, ko ienesat no ārpuses.

Varat uzaicināt apkopējas atgriezties savās mājās. Ja jūsu tīrīšanas līdzekļi nav pilnībā vakcinēti, pieprasiet, lai viņi valkā maskas visu laiku, kamēr viņi atrodas jūsu mājās. Ja neesat pilnībā vakcinēts, atstājiet māju, kamēr ir klāt apkopēji, ja varat citādi, pārvācieties uz citu mājas daļu un aizveriet durvis. Atveriet logus, lai palielinātu gaisa plūsmu visā mājā.

Ir labi iet peldēties. Baseini ir salīdzinoši droši, jo koronavīruss neizplatās caur ūdeni un hlors ir dezinfekcijas līdzeklis. Ja neesat vakcinēts, mēģiniet ievērot fizisku distancēšanos pārpildītos baseinos, bet ūdenī nevalkājiet auduma maskas: mitrā stāvoklī tās ir grūti izelpot. Ja neesat vakcinēts, pārģērbšanās laikā valkājiet masku un samaziniet laiku ģērbtuvēs, kas bieži ir pārpildītas un slikti vēdināmas.

Kas var Es daru, kad sociālā distancēšanās?

Mēģiniet uzlūkot šo sociālās distancēšanās periodu kā iespēju pievērsties lietām, kuras esat nolēmis darīt.

Lai gan jūs pašlaik izvairāties no sporta zāles, tas nenozīmē, ka nevarat vingrot. Dodieties garās pastaigās vai skrieniet ārā (dariet visu iespējamo, lai starp jums un ģimenes locekļiem, kas nav ģimenes locekļi, būtu vismaz sešas pēdas, kad atrodaties ārā). Nodarbojieties ar jogu vai citiem iekštelpu vingrinājumiem, kad laikapstākļi nav labvēlīgi.

Arī bērniem ir vajadzīgas fiziskās aktivitātes, tāpēc mēģiniet viņus katru dienu izvest ārā, lai pastaigātos vai piemājas ģimenes futbola spēlē (atcerieties, ka šis nav īstais laiks aicināt apkārtnes bērnus spēlēt).

Izvelciet galda spēles, kas krāj putekļus jūsu plauktos. Sarīkojiet ģimenes filmu vakarus. Iepazīstieties ar grāmatām, kuras esat domājis izlasīt, vai katru vakaru veiciet ģimenes locekļu lasīšanu.

Ir svarīgi uzturēt sakarus, pat ja mums nevajadzētu to darīt personīgi. Sazinieties virtuāli, izmantojot tālruņa zvanus, Skype, Zoom, video un citus sociālos medijus. Izbaudiet nesteidzīgu tērzēšanu ar senu draugu, kuram esat gribējuši piezvanīt.

Ja nekas cits neizdodas, dodieties gulēt agri un izgulieties papildus!

Vai man vajadzētu valkāt sejas masku?

Koronavīruss, kas izraisa COVID-19, galvenokārt tiek pārnests ar vīrusu daļiņām, kas peld gaisā, vai ar vīrusu saturošām pilieniņām. Pat cilvēki, kuri ir inficēti, bet kuriem nav simptomu vai kuriem simptomi vēl nav attīstījušies, var inficēt citus. Maskas palīdz samazināt izplatīšanos, tāpēc CDC jau sen ir ieteicis valkāt masku papildus fiziskai distancēšanai.

Taču 2021. gada maijā CDC pārskatīja savus norādījumus par masku nēsāšanu, pielāgojot ieteikumus atkarībā no personas vakcinācijas statusa, kā arī aktivitātes veida un vietas. Tam ir pāris iemesli. Pirmkārt, mēs esam uzzinājuši, ka pārnešana ir daudz mazāka iespēja notikt ārpus telpām, kur gaisa straumes, visticamāk, izkliedēs un atšķaida vīrusu. Turklāt arvien vairāk cilvēku ir vakcinēti. Tie, kas ir vakcinēti, ne tikai pasargā sevi no infekcijas, bet arī mazāk inficē citus.

Saskaņā ar jaunajām CDC vadlīnijām pilnībā vakcinēti cilvēki tagad var piedalīties visās iekštelpu un āra aktivitātēs bez maskas un bez fiziskas distancēšanās. Cilvēkiem, kuri nav pilnībā vakcinēti, CDC turpina ieteikt masku nēsāšanu un citus profilaktiskus pasākumus dažos āra apstākļos un lielākajā daļā iekštelpu apstākļu.

CDC ir izveidojis noderīgu diagrammu, kas ilustrē aizsardzību, ko nodrošina vakcinācija visās āra un iekštelpu aktivitātēs un kādi profilakses pasākumi jums joprojām ir jāveic, ja neesat vakcinēts. Lai skatītu diagrammu, noklikšķiniet šeit.

Kādu masku vajadzētu valkāt? CDC iesaka maskas, kas izgatavotas no diviem vai vairākiem mazgājama, elpojoša auduma slāņiem. Efektīvas ir arī ķirurģiskās maskas. Pārliecinieties, ka maska ​​pilnībā nosedz degunu un muti un cieši pieguļ sejas sāniem, neatstājot nekādas spraugas.

Lai gan N95 maskas ir visefektīvākās, šīs medicīniskās kvalitātes maskas ir jārezervē veselības aprūpes darbiniekiem.

Ķirurģiskās maskas dod priekšroku, ja rūpējaties par kādu, kam ir COVID-19.

Pēdējā laikā esmu redzējis vairāk cilvēku, kas valkā divas maskas. Vai man vajadzētu dubultot masku?

Situācijās, kad jums ir jāvalkā maska, dubultā maskēšana joprojām ir laba ideja. gadā publicēts laboratorijas pētījums MMWR novēroja maskētus un atmaskotus manekenus, kas izlaida aerosola daļiņas no iemutņa, kad tika imitēts klepus vai elpošana. Pētījumā konstatēts, ka daudzslāņu auduma maskas nēsāšana virs ķirurģiskās maskas vai cieši pieguļošas ķirurģiskās maskas lietošana būtiski paaugstināja aizsardzības līmeni gan maskas lietotājam, gan citiem.

Veicot dubultu maskēšanu, CDC iesaka valkāt pieguļošu auduma masku virs ķirurģiskās maskas. Ķirurģiskās maskas nodrošina labāku filtrēšanu, bet mēdz būt brīvi pieguļošas. Auduma maskas aizver visas spraugas un nodrošina vēl vienu aizsardzības slāni. Ķirurģiskās maskas dažreiz sauc par medicīniskām maskām vai medicīnisko procedūru maskām.

Labu aizsardzību nodrošina arī ķirurģiskās maskas pielāgošana stingrākai piegulšanai, izmantojot metodi, ko sauc par "mezglu un pievilkšanu". Lai mezglotu un saliktu ķirurģisko masku, salieciet trīsslāņu sejas maskas ausu cilpiņas vietās, kur tās savienojas ar maskas malu, pēc tam salokiet un ielieciet nevajadzīgo materiālu zem malām. Lai iegūtu video instrukcijas par ķirurģiskās maskas mezglošanu un uzlikšanu, noklikšķiniet šeit. Masku fiksatori jeb masku breketes, kas tiek nēsātas virs auduma vai ķirurģiskas maskas, var arī uzlabot maskas piegulšanu.

CDC laboratorijas pētījumā dubultmaskas vai cieši pieguļošas ķirurģiskās maskas samazināja gan aerosolu pārnešanu, gan iedarbību uz tiem par aptuveni 95%, salīdzinot ar maskēšanas neesamību.

Kāda veida maskas ir visefektīvākās un vismazākās?

Mēs zinām, ka masku nēsāšana var palīdzēt novērst koronavīrusa izplatīšanos, bloķējot pilienus, kas izdalās, kad kāds klepo, šķauda, ​​runā vai elpo. Bet kuras maskas ir labākās un sliktākās?

Djūka universitātes pētnieki izveidoja vienkāršu iestatījumu, kas ļāva saskaitīt pilienu daļiņu skaitu, kas izdalījās, kad cilvēki piecas reizes pēc kārtas teica frāzi "Palieciet veseli, cilvēki". Vispirms pētījuma dalībnieki runāja bez maskas, bet pēc tam atkārtoja vienus un tos pašus vārdus, katru reizi valkājot kādu no 14 dažāda veida sejas maskām un pārklājumiem.

Kā gaidīts, medicīniskās kvalitātes N95 maskas darbojās vislabāk, kas nozīmē, ka cauri nokļuva vismazākais pilienu skaits. Viņiem sekoja ķirurģiskās maskas. Labi darbojās arī vairākas maskas no polipropilēna, kokvilnas/propilēna maisījuma un divslāņu kokvilnas maskas, kas šūtas dažādos stilos.

Getras ierindojās pēdējā vietā. Tos sauc arī par kakla vilnām, getras mēdz būt izgatavotas no viegla auduma, un tās bieži valkā sportisti. Bandanas arī ierindojās slikti.

Pāris vienkāršus testus var palīdzēt novērtēt maskas efektivitāti: ja redzat masku, turot to pret gaismu, vai varat viegli elpot cauri maskai, iespējams, tas neko daudz nepalīdz novērst izplatīšanos.

Kurus maskas aizsargā: valkātāju, citus vai abus?

Mēs jau kādu laiku zinām, ka maskas palīdz novērst koronavīrusa izplatīšanos citiem. Pamatojoties uz esošās informācijas analīzi, jauns pētījums apgalvo, ka maskas var arī pasargāt masku lietotājus no inficēšanās.

Dažādas maskas, raksta pētījuma autors, dažādās pakāpēs bloķē vīrusu daļiņas. Ja masku dēļ tiek ieelpotas mazākas vīrusa "devas", mazāk cilvēku var inficēties, un tiem, kas to dara, slimība var būt vieglāka.

Pētnieki Ķīnā eksperimentēja ar kāmjiem, lai pārbaudītu masku iedarbību. Viņi ievietoja būrī veselus kāmjus un ar SARS-CoV-2 (COVID-19 koronavīrusu) inficētus kāmjus un atdalīja dažus veselos un inficētos kāmjus ar barjeru, kas izgatavota no ķirurģiskām maskām. Daudzi no "maskētajiem" veselajiem kāmjiem neinficējās, un tie, kuri inficējās, slimoja mazāk nekā iepriekš veselie "bezmaskas" kāmji.

Līdzīgu eksperimentu ētiski nevar veikt ar cilvēkiem. Taču pētnieki ir izpētījuši gripas vīrusa devas un atklājuši, ka cilvēki, kuri ieelpojuši lielāku gripas vīrusa devu, biežāk saslimst un piedzīvoja simptomus. Novērojumi par koronavīrusa uzliesmojumiem pārstrādes rūpnīcās un uz kruīza kuģiem arī apstiprina domu, ka maskas var palīdzēt aizsargāt masku nēsātājus.

Bez papildu izpētes mēs nevaram būt pārliecināti, ka maskas aizsargā tās valkātāju. Bet mēs zinām, ka viņi nesāpina un aizsargā citus.

Vai masku nēsāšana varētu novērst COVID nāves gadījumus?

Saskaņā ar žurnālā publicēto pētījumu Dabas medicīna, plaši izplatīta masku lietošana varētu novērst gandrīz 130 000 no 500 000 ar COVID saistītu nāves gadījumu, kas varētu notikt līdz 2021. gada martam.

Šie skaitļi ir balstīti uz epidemioloģisko modeli. Pētnieki katrā valstī apsvēra cilvēku skaitu, kuri ir uzņēmīgi pret koronavīrusa infekciju, cik daudzi tiek pakļauti iedarbībai, cik daudzi pēc tam inficējas (un infekciozi) un cik atveseļojas. Pēc tam viņi modelēja dažādus scenārijus, tostarp masku nēsāšanu, pieņemot, ka sociālās distancēšanās pilnvaras stāsies spēkā, tiklīdz nāves gadījumu skaits pārsniegs 8 uz 1 miljonu cilvēku.

Modelēšanas pētījumi ir balstīti uz pieņēmumiem, tāpēc precīzi skaitļi ir mazāk svarīgi nekā dažādu scenāriju salīdzinājumi. Šajā pētījumā scenārijs, saskaņā ar kuru 95% cilvēku vienmēr valkāja maskas publiskās vietās, izraisīja daudz mazāk nāves gadījumu, salīdzinot ar scenāriju, kurā tikai 49% cilvēku (pašu ziņotais vidējais masku nēsātāju rādītājs valstī) vienmēr valkāja maskas publiskās vietās.

Šis pētījums pastiprina vēstījumu, ka mēs varam palīdzēt novērst COVID nāves gadījumus, valkājot maskas.

Ja vēlos apciemot draugus un ģimeni, vai ir svarīgi, vai tiekamies iekštelpās vai ārā?

Labāk ir satikt draugus un ģimeni ārpus telpām. Mēs zinām, ka koronavīruss izplatās, kad kāds ieelpo vīrusu, ko inficētā persona izdala klepojot vai šķaudot, vai runājot vai elpojot. Pētījumi liecina, ka slēgtā, laboratorijas vidē pilieni, kas satur vīrusu daļiņas, var palikt uz ūdens astoņas līdz 14 minūtes. Mazākas infekciozas vīrusu daļiņas, ko sauc par aerosoliem, var pārvietoties gaisā vēl ilgāk.

Ārā gaisa straumes, visticamāk, izkliedē un atšķaida vīrusu, padarot pārnešanas iespējamību mazāku nekā mājās, birojā vai citā ierobežotā telpā ar ierobežotu gaisa cirkulāciju. Pat ārpus telpām, ja neesat pilnībā vakcinēts, ievērojiet CDC norādījumus par maskēšanu un fizisko distancēšanos, lai vēl vairāk samazinātu risku.

Vai COVID-19 vīruss var izplatīties ar gaisa kondicionēšanas palīdzību?

Mēs nezinām, vai COVID-19 vīruss izplatās ar gaisa kondicionēšanas sistēmu. Taču mēs zinām, ka, ja ir karsts un mitrs, cilvēki biežāk uzturas iekštelpās, jo logi ir aizvērti un dod iespēju vīrusam izplatīties.

Koronavīruss izplatās ar pilienu starpniecību, ko inficētā persona izdala klepojot vai šķaudot, kā arī ar mazākām, infekciozām vīrusu daļiņām, kas var pārvietoties gaisā vairākas stundas. Ārā gaisa straumes var izkliedēt un atšķaidīt vīrusu, samazinot pārnešanas iespējamību. Jūs, visticamāk, ieelposiet vīrusu telpās ar aizvērtiem logiem neatkarīgi no tā, vai jums ir vai nav ieslēgts gaisa kondicionētājs.

Ja jums ir jāatrodas telpās ar kādu ārpus savas mājsaimniecības, palieliniet gaisa cirkulāciju, cik vien iespējams turot logus atvērtus.

Vai D vitamīns aizsargā pret COVID-19?

Ir daži pierādījumi, kas liecina, ka D vitamīns var palīdzēt aizsargāt pret inficēšanos ar Covid-19 un nopietnu Covid-19 simptomu rašanos. Mēs zinām, piemēram, ka cilvēki ar zemu D vitamīna līmeni var būt jutīgāki pret augšējo elpceļu infekcijām. Viena metaanalīze atklāja, ka cilvēkiem, kuri lietoja D vitamīna piedevas, īpaši tiem, kuriem bija zems D vitamīna līmenis, bija mazāka iespēja saslimt ar akūtām elpceļu infekcijām nekā tiem, kuri to nelietoja.

D vitamīns var aizsargāt pret COVID-19 divos veidos. Pirmkārt, tas var palīdzēt uzlabot mūsu ķermeņa dabisko aizsardzību pret vīrusiem un baktērijām. Otrkārt, tas var palīdzēt novērst pārspīlētu iekaisuma reakciju, kas, kā pierādīts, veicina smagas slimības dažiem cilvēkiem ar Covid-19.

Mūsu ķermenis ražo D vitamīnu, ja tiek pakļauts saules stariem. Piecas līdz 10 minūtes sauļošanās dažās vai lielākajā daļā nedēļas dienu uz rokām, kājām vai muguras bez sauļošanās līdzekļa ļaus jums iegūt pietiekami daudz vitamīna. Labi D vitamīna pārtikas avoti ir treknas zivis (piemēram, tuncis, skumbrija un lasis), pārtikas produkti, kas bagātināti ar D vitamīnu (piemēram, piena produkti, sojas piens un graudaugi), siers un olu dzeltenumi.

Ieteicamā D vitamīna deva ir 600 SV katru dienu pieaugušajiem, kas ir jaunāki par 70 gadiem, un 800 SV katru dienu pieaugušajiem, kas vecāki par 70 gadiem. Ikdienas uztura bagātinātājs, kas satur 1000 līdz 2000 SV D vitamīna, visticamāk, ir drošs lielākajai daļai cilvēku. Pieaugušajiem kaitīgās ietekmes risks palielinās virs 4000 SV dienā.

Vai ir droši ceļot, kad esmu vakcinējies? Ko darīt, ja es neesmu vakcinēts?

CDC 2021. gada aprīlī izdotajos norādījumos teikts, ka pilnībā vakcinēti cilvēki var brīvāk ceļot ASV. Ceļotājiem nav jāveic COVID pārbaude pirms vai pēc ceļojuma, un viņiem nav jāiet karantīnā, ja vien to nepieprasa vietējās vai valsts iestādes.

CDC ir piesardzīgāks attiecībā uz starptautiskajiem ceļojumiem, atzīmējot paaugstinātu variantu risku citās valstīs, pat cilvēkiem, kuri ir pilnībā vakcinēti.

Parasti ceļošana var palielināt jūsu iespējamību izplatīties un iegūt Covid-19, ja neesat vakcinēts. CDC iesaka nevakcinētos ceļojumus pārbaudīt pirms un pēc iekšzemes ceļojumiem un veikt paškarantīnu 7 līdz 10 dienas pēc ceļojuma. Tie attur nevakcinētus cilvēkus no ceļošanas ārpus ASV.

Visiem ceļotājiem jāvalkā maska, kas nosedz degunu un muti, jāievēro sešu pēdu fiziska distance no citiem, jāizvairās no cilvēku pūļiem un bieži jāmazgā rokas. Ikvienam, kurš ir slims vai kuram ir pozitīvs COVID-19 tests, tas jādara lidot, ja vien iespējams.

Sekojiet līdzi regulatīvo aģentūru ieteikumiem ceļojumiem.

Vai ir pieejama vakcīna?

2020. gada 11. decembrī FDA piešķīra ārkārtas lietošanas atļauju (EUA) mRNS COVID-19 vakcīnai, ko izstrādājuši Pfizer un BioNTech. Šī bija pirmā Covid-19 vakcīna, kas atļauta lietošanai ASV. Nedēļu vēlāk FDA piešķīra EUA MRNS COVID-19 vakcīnai, ko izstrādājusi Moderna.

Vai COVID-19 mRNS vakcīnas darbosies pret jaunajiem koronavīrusa variantiem?

Agrīnie pierādījumi liecina, ka Pfizer/BioNTech mRNS vakcīna ir efektīva pret jaunajiem koronavīrusa variantiem. Notiek Moderna mRNS vakcīnas testēšana pret jaunajiem variantiem.

Abi jaunie varianti ir lipīgāki nekā iepriekšējie SARS-CoV-2 varianti, taču šķiet, ka tie nav nāvējošāki. Viens, ko sauc par B.1.1.7, pirmo reizi tika atklāts Apvienotajā Karalistē. Otra, ko sauc par B.1.351, izcelsme ir Dienvidāfrikā. Abi varianti tagad ir konstatēti valstīs visā pasaulē.

Abi varianti satur mutācijas vīrusa smailes proteīnā. Smailes proteīni uz SARS-CoV-2 vīrusa virsmas saistās ar cilvēka šūnām un ļauj tam iekļūt. Interesanti, ka abiem variantiem ir kopīga galvenā mutācija (saukta par N501Y) uz smailes proteīna, kas ļauj vīrusam ciešāk saistīties ar cilvēka šūnām. Šī mutācija padara jaunos variantus lipīgākus nekā iepriekšējie SARS-CoV-2 varianti.

Lai pārbaudītu Pfizer/BioNTech mRNS vakcīnas efektivitāti pret jaunajiem variantiem, pētnieki izveidoja vīrusu ar N501Y mutāciju. Pēc tam viņi paņēma asins paraugus no 20 dalībniekiem, kas piedalījās viņu vakcīnas izmēģinājumā, un pakļāva to mutācijas vīrusam. Dalībnieku asinis saturēja cilvēka šūnas, kā arī antivielas, kas ražotas, reaģējot uz Pfizer/BioNTech vakcīnu. Viņi atklāja, ka antivielas bloķēja mutācijas vīrusu no cilvēka šūnu inficēšanas tikpat efektīvi, cik tas bloķēja vīrusu bez mutācijas.

Ir nepieciešams vairāk pētījumu, lai noskaidrotu, vai šie rezultāti ir spēkā reālās pasaules apstākļos. Nav arī zināms, cik ilgi šī aizsardzība var ilgt un vai vakcīnas darbosies pret citām mutācijām, kas konstatētas šajos variantos.

Ko mēs zinām par Moderna COVID-19 vakcīnu, ko FDA ir atļāvusi lietošanai ārkārtas situācijās?

2020. gada 18. decembrī FDA piešķīra ārkārtas lietošanas atļauju (EUA) mRNS COVID-19 vakcīnai, ko izstrādājusi Moderna sadarbībā ar NIH zinātniekiem. Vakcīna ir apstiprināta lietošanai cilvēkiem no 18 gadu vecuma. Šī ir otrā Covid-19 vakcīna, kas atļauta lietošanai ASV. (Pfizer/BioNTech vakcīna saņēma EUA iepriekšējā nedēļā.)

FDA piešķīra EUA, pamatojoties uz savu efektivitātes un drošības datu analīzi, kā arī uz Vakcīnu un saistīto bioloģisko produktu konsultatīvās komitejas (VRBPAC) ieteikumu. VRBPAC ir ārēju ekspertu grupa infekcijas slimību, vakcinācijas, mikrobioloģijas, imunoloģijas un citās saistītās jomās.

Pārbaudes dokumentos, kas tika iesniegti FDA, Moderna vakcīnas kopējā efektivitāte COVID-19 novēršanā ir 94,1%. Šajā pētījumā piedalījās 30 400 pieaugušo, no kuriem puse saņēma vakcīnu, puse saņēma sālsūdens placebo injekciju. Pētījuma dalībnieku vidū bija 196 infekcijas. No tiem 185 bija placebo grupā un 11 bija vakcīnu grupā. Visi 30 smagas COVID gadījumi tika novēroti placebo grupā, kas skaidri liecina, ka vakcīna samazina smagas slimības risku.

Vakcīna bija vienlīdz efektīva cilvēkiem, kas vecāki un jaunāki par 65 gadiem, vīriešiem un sievietēm, cilvēkiem ar un bez tādiem veselības stāvokļiem, kas viņiem rada lielu smagu slimību risku, kā arī dažādām rasu un etniskajām grupām.

Visbiežāk novērotās vakcīnas blakusparādības bija sāpes injekcijas vietā, nogurums, galvassāpes, muskuļu sāpes, locītavu sāpes un drebuļi.

Šai vakcīnai nepieciešamas divas devas ar četru nedēļu intervālu. Mēs vēl nezinām, cik ilgi saglabāsies imunitāte pret šo vakcīnu.

Moderna vakcīna satur sintētisko messenger RNS (mRNS), ģenētisko materiālu, kas iekļūst cilvēka šūnās un liek tām ražot smailes proteīnu, kas atrodas uz SARS-CoV-2 vīrusa virsmas. Ķermenis atpazīst smailes proteīnu kā iebrucēju un ražo pret to antivielas. Drīz pēc tam šūna sadala mRNS nekaitīgos gabalos. Ja antivielas vēlāk saskaras ar īsto vīrusu, tās ir gatavas to atpazīt un iznīcināt, pirms tas izraisa slimību.

Atšķirībā no Pfizer vakcīnas, kurai nepieciešama uzglabāšana īpaši aukstā stāvoklī, Moderna vakcīnu var uzglabāt normālā saldētavas temperatūrā. Tas var nodrošināt plašāku izplatīšanu aptiekās un citās telpās, kas nav aprīkotas īpaši aukstā uzglabāšanai.

Ko mēs zinām par Pfizer/BioNTech COVID-19 vakcīnu, ko FDA ir atļāvusi lietošanai ārkārtas situācijās?

2020. gada 11. decembrī FDA piešķīra ārkārtas lietošanas atļauju (EUA) mRNS COVID-19 vakcīnai, ko izstrādājuši Pfizer un BioNTech. Vakcīna ir apstiprināta lietošanai cilvēkiem no 16 gadu vecuma. Šī ir pirmā Covid-19 vakcīna, kas atļauta lietošanai ASV.

FDA piešķīra EUA, pamatojoties uz savu efektivitātes un drošības datu analīzi, kā arī uz Vakcīnu un saistīto bioloģisko produktu konsultatīvās komitejas (VRBPAC) ieteikumu 10. decembrī. VRBPAC ir ārēju ekspertu grupa infekcijas slimību, vakcinācijas, mikrobioloģijas, imunoloģijas un citās saistītās jomās.

Pfizer/BioNTech vakcīnas izmēģinājuma rezultāti tika publicēti Jaunanglijas medicīnas žurnāls. Dati liecina, ka vakcīna samazināja COVID-19 risku par 95%. Izmēģinājumā piedalījās gandrīz 44 000 pieaugušo, no kuriem katrs saņēma divus šāvienus, ar trīs nedēļu intervālu, puse saņēma vakcīnu un puse saņēma placebo (sālsūdens injekciju). No 170 Covid-19 gadījumiem, kas attīstījās pētījuma dalībniekiem, 162 bija placebo grupā un astoņi bija vakcīnas grupā. Deviņi no 10 smagajiem COVID gadījumiem radās placebo grupā, kas liecina, ka vakcīna samazināja gan vieglas, gan smagas COVID saslimšanas risku.

Saskaņā ar NEJM rakstā, vakcīna bija līdzīgi efektīva dažādu rasu un etnisko piederību, ķermeņa svara kategoriju, līdzāspastāvošu medicīnisku stāvokļu esamības vai neesamības un vecuma (jaunāki un vecāki par 65 gadiem) pētījuma dalībniekiem. Ir vērts atzīmēt, ka FDA jutās ērti, atļaujot vakcīnu 16 un 17 gadus veciem bērniem, lai gan pētījumā iesaistīto pusaudžu skaits bija neliels.

Nevienam no pētījuma dalībniekiem nebija nopietnas blakusparādības. Tomēr lielākajai daļai bija sāpes injekcijas vietā. Tāpat aptuveni puse no tiem, kas saņēma vakcīnu, ziņoja par vieglu vai mērenu nogurumu vai galvassāpēm, vai abiem. Diezgan bieži bija arī drebuļi un drudzis. Simptomi gandrīz vienmēr izzuda 24 līdz 48 stundu laikā.

Šai vakcīnai nepieciešamas divas devas ar trīs nedēļu intervālu. Lai gan šķiet, ka vakcīna nodrošina saprātīgu aizsardzību pēc pirmās devas, tā nodrošina spēcīgāku aizsardzību pēc divām devām. Mēs vēl nezinām, cik ilgi saglabāsies imunitāte pret šo vakcīnu.

Pfizer/BioNTech vakcīna ir mRNS vakcīna. Vakcīna satur sintētisko messenger RNS (mRNS), ģenētisko materiālu, kas satur instrukcijas olbaltumvielu iegūšanai. Ķermeņa iekšienē mRNS iekļūst cilvēka šūnās un liek tām ražot vienu SARS-CoV-2 vīrusa komponentu un uz vīrusa virsmas atrodamo "smailes" proteīnu. Ķermenis atpazīst smailes proteīnu kā iebrucēju un ražo pret to antivielas. Ja antivielas vēlāk saskaras ar īsto vīrusu, tās ir gatavas to atpazīt un iznīcināt, pirms tas izraisa slimību. mRNS vakcīnas jāuzglabā ļoti aukstā temperatūrā, ja nepareizi uzglabātas vakcīnas var kļūt neaktīvas.

Veselības aprūpes darbinieki un ilgtermiņa aprūpes iestāžu iedzīvotāji un darbinieki būs pirmie, kas saņems vakcīnu.

Vai man jāsaņem Covid-19 vakcīna, ja man jau ir COVID-19?

Saskaņā ar CDC teikto, pat cilvēki, kuri jau ir saslimuši ar COVID-19, var gūt labumu no vakcīnas.

Lūk, ko mēs zinām. COVID-19 var izraisīt nopietnas slimības un ilgstošas ​​​​komplikācijas pat jaunākiem cilvēkiem un tiem, kuriem nav pamata veselības traucējumu. Mēs arī zinām, ka persona, kurai jau ir bijis COVID-19, var atkārtoti inficēties, lai gan tas nav izplatīts.

No otras puses, mēs nezinām, cik ilgi saglabājas dabiskā imunitāte pret COVID-19 un aizsardzība, kas izriet no slimības. Nav skaidrs, vai dabiskās imunitātes stiprums vai ilgums atšķiras atkarībā no sākotnējās slimības smaguma pakāpes. Mēs arī nezinām, cik ilgi saglabājas imunitāte, ko nodrošina vakcīnas.

Sākotnējās vakcīnas izvietošanas laikā pirmajās rindās strādājošajiem un cilvēkiem ilgstošas ​​aprūpes iestādēs, piemēram, pansionātos, cilvēki, kuriem ir tiesības saņemt vakcīnu, to saņems neatkarīgi no tā, vai viņi iepriekš ir bijuši vai nē. Viņi ir pirms vakcinācijas tiek pārbaudītas antivielas.

Tā kā zinātnieki uzzina vairāk par dabisko imunitāti pēc Covid slimības, vakcinācijas kritērijiem, kuru pamatā ir antivielu klātbūtne, nākotnē var būt nozīme.

Vai Covid vakcīna neļaus man inficēt citus?

Atbilde ir, mēs nezinām.

Pfizer/BioNTech un Moderna vakcīnu klīniskajos pētījumos atklājās, ka abas veic labu darbu, novēršot simptomātisku COVID-19 slimību, tostarp smagu COVID-19. Tomēr izmēģinājumos netika novērtēts, vai vakcinētai personai ir mazāka iespēja izplatīt vīrusu kādam citam.

Iespējams, ka vakcīnas aizsargā pret COVID-19 slimību, vispirms novēršot cilvēka inficēšanos. Tomēr ir arī iespējams, ka vakcīna aizsargā cilvēku no COVID-19 saslimšanas, bet nepasargā cilvēku no inficēšanās. Citiem vārdiem sakot, vakcinētās personas degunā un kaklā var būt vīrusa replikācija, pat ja viņi ir pasargāti no saslimšanas.

Bet vai tas nozīmē, ka jums ir pietiekami daudz vīrusu jūsu degunā un kaklā, lai inficētu kādu citu? Nav nepieciešams. Iespējams, ka vakcīnas izraisītā imūnreakcija, kas pasargā jūs no saslimšanas, arī samazina vīrusa daudzumu jūsu degunā un kaklā līdz tādam līmenim, ka jūs, visticamāk, neizplatīsit to kādam citam. Bet mums ir nepieciešams vairāk pētījumu, lai pārliecinātos.

Apakšējā līnija? Ja esat viena no pirmajām cilvēku grupām, kas vakcinējas, vislabāk ir turpināt valkāt maskas un ievērot fizisko distanci, lai aizsargātu citus, kuri vēl nav saņēmuši vakcīnu.

Vai pēc Covid-19 vakcīnas saņemšanas es varu pārtraukt veikt citus piesardzības pasākumus?

Vakcīna pasargās jūs no saslimšanas, taču tā var nepasargāt jūs no citu inficēšanas. Tāpēc vismaz pagaidām jums vajadzētu turpināt valkāt masku un fiziski distancēties no citiem pat pēc šāviena.

Pfizer/BioNTech un Moderna vakcīnu klīniskajos pētījumos atklājās, ka abas veic labu darbu, novēršot simptomātisku COVID-19 slimību, tostarp smagu COVID-19. Tomēr izmēģinājumos netika novērtēts, vai vakcinētai personai ir mazāka iespēja izplatīt vīrusu kādam citam.

Iespējams, ka vakcīnas aizsargā pret COVID-19 slimību, neļaujot cilvēkam inficēties. Tomēr ir arī iespējams, ka vakcīna pasargā cilvēku no saslimšanas, bet neliedz vīrusam vairoties šīs personas degunā un kaklā.

Vai tas nozīmē, ka jūsu degunā un kaklā ir pietiekami daudz vīrusu, lai inficētu kādu citu? Nav nepieciešams. Bet mums ir nepieciešams vairāk pētījumu, lai pārliecinātos.

Kur tas mūs atstāj? Ja esat viena no pirmajām cilvēku grupām, kas vakcinējas, vislabāk ir turpināt valkāt maskas un ievērot fizisko distanci, lai aizsargātu citus, kuri vēl nav saņēmuši vakcīnu.

Kam bija jānotiek, pirms FDA atļāva Covid-19 vakcīnu?

Veiksmīgai Covid-19 vakcīnai bija droši un efektīvi jāstimulē organisma imūnsistēma, lai radītu antivielas, kas aizsargā pret COVID-19 koronavīrusu. 2020. gada 11. decembrī FDA piešķīra ārkārtas lietošanas atļauju (EUA) mRNS COVID-19 vakcīnai, ko izstrādājuši Pfizer un BioNTech. Nedēļu vēlāk FDA piešķīra EUA citai mRNS COVID-19 vakcīnai, kuru izstrādāja Moderna. Atpaliek vismaz divas citas vakcīnas kandidātes, un vairāk iespējamo Covid-19 vakcīnu atrodas dažādās izstrādes un testēšanas stadijās.

Lai apstiprinātu vakcīnu, ir jāveic šādas darbības:

  • Pirmsklīniskā pārbaude: dzīvnieki ir inficēti ar vīrusu. Zinātnieki pēta savu imūnreakciju, lai noskaidrotu, kādi imūnās atbildes aspekti varētu būt būtiski aizsardzībai. Parasti vakcīnu vispirms pārbauda ar dzīvniekiem. Tomēr tādas pandēmijas apstākļos kā šī, izmēģinājumu ar dzīvniekiem posmu var izlaist.
  • 1. fāzes izmēģinājumi: Vakcīnu pārbauda nelielās cilvēku grupās, lai noteiktu, kāda deva droši un konsekventi stimulē imūnsistēmu. Šajā posmā zinātnieki vēl nezina, vai vakcīnas izraisītā imūnreakcija pasargās no vīrusa.
  • 2. fāzes izmēģinājumi: Vakcīna tiek ievadīta simtiem vai tūkstošiem cilvēku. Zinātnieki turpina koncentrēties uz to, vai vakcīna ir droša un rada konsekventu imūnreakciju.
  • 3. fāzes izmēģinājumi: šajos izmēģinājumos parasti tiek reģistrēti desmitiem tūkstošu cilvēku. Šī ir pirmā fāze, kas ietver placebo grupu. Tas salīdzina to cilvēku skaitu, kuri saslimst vakcīnas grupā, ar to cilvēku skaitu, kuri saslimst placebo grupā. Šī ir vienīgā fāze, kas var parādīt, vai vakcīnas izraisītā imūnreakcija patiešām aizsargā pret infekciju reālajā pasaulē.

Kas ir mRNS vakcīnas un kā tās darbojas, lai palīdzētu novērst COVID-19?

mRNS jeb messenger RNS ir ģenētisks materiāls, kas satur instrukcijas olbaltumvielu iegūšanai. mRNS vakcīnas pret COVID-19 satur sintētisku mRNS. Ķermeņa iekšienē mRNS iekļūst cilvēka šūnās un liek tām ražot "smailes" proteīnu, kas atrodas uz SARS-CoV-2 virsmas, vīrusa, kas izraisa COVID-19. Ķermenis atpazīst smailes proteīnu kā iebrucēju un sāk ražot pret to antivielas. Drīz pēc tam šūna sadala mRNS nekaitīgos gabalos. Ja antivielas vēlāk saskaras ar īsto vīrusu, tās ir gatavas to atpazīt un iznīcināt, pirms tas izraisa slimību.

FDA 2020. gada decembrī piešķīra FDA divām mRNS vakcīnām, no kurām vienu izveidoja Pfizer un BioNTech, bet otru izstrādāja Moderna.

Vai mRNS vakcīna var mainīt manu DNS?

MRNS vakcīna un pirmā Covid-19 vakcīna, kurai FDA ir piešķīrusi ārkārtas lietošanas atļauju (EUA), nevar mainīt jūsu DNS.

mRNS jeb messenger RNS ir ģenētisks materiāls, kas satur instrukcijas olbaltumvielu iegūšanai. mRNS vakcīnas pret COVID-19 satur cilvēka radītu mRNS. Ķermeņa iekšienē mRNS iekļūst cilvēka šūnās un liek tām ražot "smailes" proteīnu, kas atrodas uz COVID-19 vīrusa virsmas. Drīz pēc tam, kad šūna veido smailu proteīnu, šūna sadala mRNS nekaitīgos gabalos. Nevienā brīdī mRNS neiekļūst šūnas kodolā, kur dzīvo mūsu ģenētiskais materiāls (DNS).

Imūnsistēma atpazīst smailes proteīnu kā iebrucēju un ražo pret to antivielas. Ja antivielas vēlāk saskaras ar īsto vīrusu, tās ir gatavas to atpazīt un iznīcināt, pirms tas izraisa slimību.

Esmu stāvoklī un plānoju beidzot barot bērnu ar krūti. Vai man ir droši iegūt mRNS COVID-19 vakcīnu?

CDC, Amerikas Dzemdību un ginekoloģijas koledža (ACOG) un Mātes un augļa medicīnas biedrība piekrīt, ka jaunās mRNS COVID-19 vakcīnas (Pfizer/BioNTech un Moderna) jāpiedāvā grūtniecēm un sievietēm, kas baro bērnu ar krūti. Taču joprojām ir daudz, ko mēs nezinām par vakcīnu drošību šajās populācijās, un jūsu ārsts ir vislabākajā situācijā, lai sniegtu jums padomu, pamatojoties uz jūsu personīgajiem veselības riskiem un vēlmēm.

Šeit ir daži faktori, kas jāņem vērā. Pirmkārt, lai gan faktiskais smagas COVID-19 saslimšanas un nāves risks grūtnieču vidū ir ļoti zems, tas ir augstāks, salīdzinot ar grūtniecēm no tās pašas vecuma grupas. Turklāt pētījumi liecina, ka Covid-19 var palielināt priekšlaicīgu dzemdību risku, īpaši tiem, kam ir smaga slimība. Vīrusa pārnešana no mātes bērnam grūtniecības laikā ir iespējama, taču šķiet, ka tas ir rets gadījums.

mRNS vakcīnas pētījumos apzināti netika iekļautas grūtnieces, tāpēc mūsu zināšanas par mRNS COVID-19 vakcīnu drošību grūtniecības laikā ir ierobežotas. Pētījumos ar dzīvniekiem mRNS vakcīnas neietekmēja auglību vai neradīja problēmas ar grūtniecību. mRNS vakcīnas nesatur vīrusu, tāpēc tās nevar izraisīt COVID-19 sievietei vai viņas mazulim. Un mūsu ķermeņi ātri sadala un izvada vakcīnā izmantotās mRNS daļiņas, tāpēc maz ticams, ka tās sasniegs vai šķērsos placentu. No otras puses, imunitāte, ko sieviete rada vakcinācijas rezultātā, var šķērsot placentu un var palīdzēt nodrošināt bērna drošību pēc piedzimšanas.

Eksperti arī uzskata, ka, visticamāk, ir droši iegūt mRNS COVID-19 vakcīnu, ja barojat bērnu ar krūti, lai gan vakcinācijas izmēģinājumos netika iekļauti cilvēki, kas baro bērnu ar krūti. Kad cilvēks tiek vakcinēts zīdīšanas laikā, viņa imūnsistēma izstrādā antivielas, kas aizsargā pret COVID-19. Šīs antivielas var tikt nodotas bērnam ar mātes pienu, un tās var palīdzēt aizsargāt pret infekciju.

Kas ir adenovīrusa vakcīnas? Ko mēs zinām par adenovīrusu vakcīnām, kas tiek izstrādātas pret Covid-19?

Adenovīrusi var izraisīt dažādas slimības, tostarp saaukstēšanos. Tās tiek izmantotas divās vadošajās COVID-19 vakcīnas kandidātēs kā kapsulas (zinātniskais termins ir vektori), lai organismā nogādātu koronavīrusa smailes proteīnu. Smailes proteīns mudina imūnsistēmu ražot pret to antivielas, sagatavojot ķermeni uzbrukumam SARS-CoV-2 vīrusam, ja tas vēlāk inficē ķermeni.

2020. gada decembrī AstraZeneca publicēja daudzsološus uz adenovīrusu balstītas vakcīnas rezultātus, ko tā izstrādāja kopā ar Oksfordas universitātes pētniekiem. Pētījums tika publicēts žurnālā Lancet.

The Lancet Vakcīnas efektivitātes analīze balstījās uz 11 636 pieaugušajiem pētījuma dalībniekiem. No tiem 4440 dalībnieki saņēma pilnu koronavīrusa vakcīnas devu, kam pēc četrām nedēļām sekoja vēl viena pilna deva. Gandrīz 1400 dalībnieku saņēma pusi koronavīrusa vakcīnas devas, kam pēc četrām nedēļām sekoja pilna deva. Kontroles grupa saņēma meningīta vakcīnu, kam sekoja otra meningīta vakcīna vai placebo (sālsūdens injekcija). Bija 131 dokumentēts COVID-19 gadījums, un tie visi notika vismaz divas nedēļas pēc otrās šāviena.

Koronavīrusa vakcīna samazināja COVID-19 risku vidēji par 70,4%, salīdzinot ar kontroles grupu. Pārsteidzoši, ka pusdevas/pilnas devas vakcīnas kombinācija bija efektīvāka, samazinot COVID-19 risku par 90%. Pilnas devas kombinācija samazināja risku par 62%. Nevienam no dalībniekiem, kas saņēma koronavīrusa vakcīnu, neattīstījās smags COVID-19 vai nebija jā hospitalizē. Samazinājās arī asimptomātiskie gadījumi.

Lielākā daļa pētījuma dalībnieku bija vecumā no 18 līdz 55 gadiem un baltā krāsā. Turklāt pētījuma dalībnieki bija veseli vai viņiem bija stabili pamata veselības traucējumi. Ir nepieciešams vairāk datu, lai saprastu, cik efektīva šī vakcīna ir cilvēkiem, kas vecāki par 55 gadiem, krāsainiem cilvēkiem un cilvēkiem ar pamatslimībām. Šī vakcīna ir klīniskajos pētījumos visā pasaulē, tostarp ASV. Bet šī analīze tika balstīta uz datiem no Apvienotās Karalistes un Brazīlijas.

AstraZeneca/Oksfordas Universitātes vakcīnā izmantotais adenovīruss ir novājināta, nekaitīga šimpanzes saaukstēšanās adenovīrusa forma. Šo vakcīnu var droši uzglabāt ledusskapī vairākus mēnešus.

Kurš saņems pirmās Covid-19 vakcīnas un kurš būs nākamais?

Decembra vidū veselības aprūpes darbinieki un ilgtermiņa aprūpes iestāžu iedzīvotāji un darbinieki kļuva par pirmo grupu ASV, kas sāka saņemt Covid-19 vakcīnu. CDC ir ieteicis pēc tam vakcinēt pieaugušos vecumā no 75 gadiem un galvenos darbiniekus. Viņiem sekos pieaugušie vecumā no 65 līdz 74 gadiem, cilvēki vecumā no 16 līdz 64 gadiem ar veselības traucējumiem, kuru dēļ viņiem ir liels risks saslimt ar Covid-19, un atlikušie būtiskie darbinieki.

Valsts un vietējām iestādēm nav pienākuma ievērot CDC ieteikumus, tās var mainīt vakcīnu izplatīšanas secību pēc saviem ieskatiem.

ASV ir aptuveni 21 miljons veselības aprūpes darbinieku, kas veic dažādus darbus slimnīcās un ambulatorās klīnikās, aptiekās, neatliekamās medicīniskās palīdzības dienestos un sabiedrības veselībā.Vēl trīs miljoni cilvēku dzīvo vai strādā ilgstošas ​​aprūpes iestādēs, tostarp pansionātos, aprūpes iestādēs un aprūpes iestādēs. COVID-19 ir smagi skārusi ilgtermiņa aprūpes iestāžu iedzīvotājus. Galvenās līnijas darbinieki ir tie, kuri nevar strādāt no mājām un, iespējams, nevarēs fiziski attālināties darba laikā. Tajos ietilpst pirmās palīdzības sniedzēji, piemēram, ugunsdzēsēji un policija, skolotāji un dienas aprūpes darbinieki, pasta darbinieki un cilvēki, kas strādā pārtikas preču veikalos.

CDC vadlīnijas ir balstītas uz Imunizācijas prakses padomdevējas komitejas (ACIP) ieteikumu, ko veido vakcinoloģijas, imunoloģijas, virusoloģijas, sabiedrības veselības un citu saistīto jomu eksperti. Viņu darbs neaprobežojas tikai ar Covid-19 vakcīnu, viņi plaši konsultē CDC par vakcinācijām un imunizācijas grafikiem.

Kādas ir daudzsološās vakcīnas pret Covid-19, kas tiek izmeklētas?

Visā pasaulē pašlaik ir vairāk nekā 70 dažādas Covid-19 vakcīnas dažādās testēšanas un izstrādes stadijās: 1. fāze (drošība), 2. fāze (optimālā deva, grafiks un koncepcijas pierādījums) un 3. fāze (efektivitāte, blakusparādības) ) izmēģinājumi ar cilvēkiem.

2020. gada decembrī FDA piešķīra ārkārtas lietošanas atļauju (EUA) divām Covid-19 vakcīnām, no kurām vienu izstrādāja Pfizer/BioNTech un otru izstrādāja Moderna. Šajās vakcīnās tiek izmantota tāda veida molekula, ko sauc par messenger RNS (mRNS), ko var ļoti ātri masveidā ražot. Šajās vakcīnās mRNS liek cilvēka šūnām izveidot proteīnu, kas izskatās gluži kā smailes proteīns, kas nostiprina koronavīrusa virsmu un ļauj tam iekļūt cilvēka šūnās. Ķermenis atpazīst smailes proteīnu kā iebrucēju un ražo pret to antivielas. Ja antivielas vēlāk saskaras ar īsto vīrusu, tās ir gatavas to atpazīt un iznīcināt, pirms tas izraisa slimību.

Arī divas citas vakcīnas pieejas ir daudzsološas.

  • AstraZeneca un Oksfordas Universitātes izveidotajā hibrīdajā vakcīnā tiek izmantota modificēta, nekaitīga šimpanzes saaukstēšanās adenovīrusa forma, lai organismā nogādātu koronavīrusa smailes proteīnu. Smailes proteīns mudina imūnsistēmu ražot pret to antivielas, sagatavojot ķermeni uzbrukumam SARS-CoV-2 vīrusam, ja tas vēlāk inficē ķermeni. Uzņēmums publicēja daudzsološus 3. fāzes izmēģinājuma rezultātus Lancet 2020. gada decembrī.
  • Citā hibrīda vakcīnā tiek izmantots cilvēka saaukstēšanās adenovīruss, lai organismā nogādātu koronavīrusa smailes proteīnu. Šo platformu izstrādāja Hārvardas Medicīnas skolas zinātnieki sadarbībā ar Džonsonu un Džonsonu. Šī vakcīna ir 3. fāzes izmēģinājumos.

Galvenais COVID-19 vakcīnu jautājums būs, cik ilgi aizsardzība varētu ilgt.

Vai cilvēks, kurš ir inficēts ar koronavīrusu, var inficēties vēlreiz?

Dabiskā imunitāte pret COVID-19 ir aizsardzība, kas rodas no slimošanas. Bet mēs nezinām, cik ilgi pastāv dabiskā imunitāte un cik spēcīga tā ir. Tātad, vai mēs varam paļauties uz dabisko imunitāti, kas pasargās mūs no atkārtotas inficēšanās? Ja jā, tad uz cik ilgu laiku? Diemžēl mēs nezinām atbildi ne uz vienu no šiem jautājumiem.

Ir bijuši daži apstiprināti atkārtotas inficēšanās gadījumi ar COVID-19. Citiem vārdiem sakot, cilvēks saslima ar COVID-19, atveseļojās un pēc tam atkal inficējās. Tas ir reti, bet tas var notikt.

Pierādījumi liecina, ka cilvēki, kuri jau ir saslimuši ar Covid-19, gūst labumu no vakcīnas, iespējams, pat vairāk nekā vakcinēti cilvēki, kuri iepriekš nebija inficēti. Pagaidām cilvēki ir tiesīgi saņemt Covid-19 vakcīnu neatkarīgi no tā, vai viņi iepriekš ir bijuši vai nē. Vakcinācijas kritēriji nākotnē var mainīties, jo zinātnieki uzzinās vairāk par dabisko imunitāti pēc Covid slimības.

Ir arī vērts atzīmēt, ka persona, kas ir atkārtoti inficēta, pat ja tā ir bez simptomiem, var izplatīt vīrusu citiem. Tas nozīmē, ka, ja neesat vakcinēts, jums jāturpina valkāt maskas, trenēties fiziska distancēšanās un izvairīties no cilvēku pūļa, kā ieteicis CDC.

Kas ir ganāmpulka imunitāte, un vai tai varētu būt nozīme COVID-19 izplatības apturēšanā?

Ganāmpulka imunitāte rodas, ja pietiekami daudz cilvēku kļūst imūni pret slimību, lai padarītu tās izplatību maz ticamu. Tā rezultātā tiek aizsargāta visa kopiena, pat tie, kuri paši nav imūni. Ganāmpulka imunitāte parasti tiek panākta ar vakcināciju, bet tā var rasties arī ar dabisku infekciju.

Eksperti sākotnēji lēsa, ka kaut kur no 60% līdz 70% iedzīvotāju ir jābūt imūniem, lai sasniegtu ganāmpulka imunitāti. Pavisam nesen viņi ir palielinājuši šo aplēsi līdz gandrīz 90%. (Pagaidām mēs ne tuvu neesam skaitļi, kas nepieciešami ganāmpulka imunitātes sasniegšanai.)

Ganāmpulka imunitātes sasniegšana dabiskās infekcijas ceļā nozīmē, ka daudzi cilvēki saslimst un daudzi nomirs. Šie riski var samazināties, izstrādājot efektīvas ārstēšanas metodes. Tomēr mēs joprojām nezinām, cik ilgi cilvēki, kas atveseļojušies no COVID-19, saglabās imūnsistēmu pret atkārtotu inficēšanos.

Ideālā gadījumā mēs sasniegsim ganāmpulka imunitāti, jo vairāk cilvēku visā pasaulē saņems vakcīnas, kas nodrošinās ilgstošu imunitāti.

Vai pneimokoku vakcīna palīdzēs aizsargāt mani pret koronavīrusu?

Vakcīnas pret pneimoniju, piemēram, pneimokoku vakcīna un Hemophilus influenza tipa B (Hib) vakcīna, tikai palīdz aizsargāt cilvēkus no šīm specifiskajām bakteriālajām infekcijām. Tie neaizsargā pret koronavīrusa pneimoniju, tostarp pneimoniju, kas var būt daļa no COVID-19. Tomēr, lai gan šīs vakcīnas īpaši neaizsargā pret koronavīrusu, kas izraisa COVID-19, tās ir ļoti ieteicamas aizsardzībai pret citām elpceļu slimībām.

Vai mans mājdzīvnieks var mani inficēt ar vīrusu, kas izraisa COVID-19?

Pašlaik tiek uzskatīts, ka ir maz ticams, ka mājdzīvnieki, piemēram, suņi vai kaķi, varētu izplatīt COVID-19 vīrusu uz cilvēkiem. Tomēr mājdzīvnieki var izplatīt citas infekcijas, kas izraisa slimības, tostarp E. coli un Salmonella, tāpēc pēc saskarsmes ar mājdzīvniekiem rūpīgi nomazgājiet rokas ar ziepēm un ūdeni.

Vai cilvēki var inficēt mājdzīvniekus ar COVID-19 vīrusu?

Šķiet, ka vīruss, kas izraisa COVID-19, izplatās no cilvēkiem uz mājdzīvniekiem, norāda FDA. Pētījumos atklāts, ka kaķi un seski biežāk inficējas nekā suņi.

Ja jums ir mājdzīvnieks, rīkojieties šādi, lai samazinātu viņu inficēšanās risku:

  • Neļaujiet mājdzīvniekiem sazināties ar cilvēkiem vai dzīvniekiem, kas nedzīvo jūsu mājsaimniecībā.
  • Ja iespējams, turiet kaķus telpās, lai novērstu to mijiedarbību ar citiem dzīvniekiem vai cilvēkiem.
  • Pastaigājiet suņus pie pavadas, uzturoties vismaz sešu pēdu attālumā no citiem cilvēkiem un dzīvniekiem.
  • Izvairieties no suņu parkiem vai sabiedriskām vietām, kur pulcējas liels skaits cilvēku un suņu.

Ja saslimstat ar COVID-19, ierobežojiet kontaktus ar saviem mājdzīvniekiem, tāpat kā to darītu apkārtnē. Tas nozīmē, ka jums ir jāatsakās no glāstīšanas, pieglausties, tikt skūpstītam vai laizītam, kā arī ar mājdzīvnieku nedalīties ar barību vai gultas piederumiem, līdz jūtaties labāk. Ja iespējams, palūdziet kādam citam ģimenes loceklim rūpēties par mājdzīvniekiem, kamēr esat slims. Ja jums ir jārūpējas par mājdzīvnieku, kamēr esat slims, nomazgājiet rokas pirms un pēc saskarsmes ar mājdzīvniekiem un valkājiet sejas masku.

Ko es varu darīt, lai saglabātu savu imūnsistēmu stipru?

Jūsu imūnsistēma ir jūsu ķermeņa aizsardzības sistēma. Kad jūsu ķermenī nokļūst kaitīgs iebrucējs, piemēram, saaukstēšanās vai gripas vīruss, vai koronavīruss, kas izraisa COVID-19, jūsu imūnsistēma sāk uzbrukumu. Šis uzbrukums, kas pazīstams kā imūnreakcija, ir notikumu virkne, kas ietver dažādas šūnas un attīstās laika gaitā.

Vispārīgo veselības vadlīniju ievērošana ir labākais solis, ko varat spert, lai saglabātu imūnsistēmu spēcīgu un veselīgu. Ikviena ķermeņa daļa, ieskaitot imūnsistēmu, darbojas labāk, ja tā ir aizsargāta no vides uzbrukumiem un tiek atbalstīta ar veselīga dzīvesveida stratēģijām, piemēram, šīm:

  • Nesmēķējiet un nesmēķējiet.
  • Ēdiet diētu, kurā ir daudz augļu, dārzeņu un veseli graudi.
  • Lietojiet multivitamīnus, ja jums ir aizdomas, ka ar uzturu nesaņemat visas nepieciešamās uzturvielas.
  • Regulāri vingro.
  • Saglabājiet veselīgu svaru.
  • Kontrolējiet savu stresa līmeni.
  • Kontrolējiet savu asinsspiedienu.
  • Ja lietojat alkoholu, dzeriet tikai ar mēru (vīriešiem ne vairāk kā vienu līdz divus dzērienus dienā, sievietēm ne vairāk kā vienu dienā).
  • Gulēt pietiekami daudz.
  • Veiciet pasākumus, lai izvairītos no infekcijas, piemēram, bieži mazgājiet rokas un mēģiniet nepieskarties rokām sejai, jo kaitīgie mikroorganismi var iekļūt caur acīm, degunu un muti.

Vai man vajadzētu doties pie ārsta vai zobārsta, lai veiktu steidzamus apmeklējumus?

Daudzas medicīnas un zobārstniecības iestādes ir ieviesušas visaptverošus drošības pasākumus, lai palīdzētu aizsargāt jūs, ārstu un biroja darbiniekus, kā arī citus pacientus. Ja jūtaties noraizējies par personīgu apmeklējumu, zvaniet uz praksi.

Daudzi ārstu biroji arvien vairāk sniedz televeselības pakalpojumus. Tas var nozīmēt tikšanās ar tālruņa zvanu vai virtuālu apmeklējumu, izmantojot video tērzēšanas pakalpojumu. Lūdziet ieplānot televeselības tikšanos ar savu ārstu par jaunu vai notiekošu, steidzamu lietu. Ja pēc sarunas ar jums ārsts vēlēsies jūs redzēt klātienē, viņš vai viņa jūs informēs.

Ko darīt, ja jūsu tikšanās nav steidzamas, bet arī neietilpst zema riska kategorijā? Piemēram, ja jums ir ieteikts periodiski veikt skenēšanu pēc vēža remisijas, ja ārsts regulāri apmeklē jūs, lai uzraudzītu stāvokli, kura gadījumā jums ir paaugstināts risks, vai ja jūsu ārstēšana atšķiras atkarībā no jaunākajiem testa rezultātiem? Šajos un līdzīgos gadījumos zvaniet savam ārstam, lai saņemtu padomu.

Vai man vajadzētu atlikt plānveida operāciju?

Plānveida operāciju un procedūru pieejamība visā Amerikas Savienotajās Valstīs ir ļoti mainīga, un tā var atspoguļot gadījumu skaitu un infekcijas līmeni noteiktā apgabalā. Ja jūsu reģionā pieaug COVID-19 gadījumu skaits, ir pilnīgi iespējams, ka slimnīca vai medicīnas centrs, kurā jums ir ieplānota procedūra, jūs jau ir atcēlis vai pārcēlis. Ja nē, apsveriet iespēju atlikt jebkuru procedūru, kas var pagaidīt.

To sakot, paturiet prātā, ka "izvēles" ir relatīvs termins. Piemēram, jums, iespējams, nebija nepieciešama tūlītēja operācija išiass, ko izraisa diska trūce. Bet sāpes var būt tik spēcīgas, ka jūs nevarētu izturēt operācijas atlikšanu uz nedēļām vai, iespējams, mēnešiem. Tādā gadījumā jums un jūsu ārstam ir jāpieņem kopīgs lēmums par turpmāko darbību.


Šūnu sasaldēšanas sistēma optimālai šūnu kriokonservēšanai

Šūnu līniju in vitro kultūra ir ciešs mēģinājums atdarināt fizioloģiskos apstākļus un attīstīt izpratni par normālām reakcijām un funkcijām šūnu līmenī. Parasti tiek izmantotas divu veidu kultivētās šūnas: vienslāņu kultūras, kurās šūnām ir iespēja pievienoties substrātam (trauki, kas pārklāti ar matricu, T-kolbas, daudzu iedobju plāksnes) un suspensijas kultūras, kurās šūnas aug brīvi peldot piemērotā veidā. augšanas barotne.

Pielipušo šūnu līniju (vienslāņa kultūru) augšana ir atkarīga no virsmas laukuma pieejamības un barības vielu satura barotnē. Kad šūnas sasniedz saplūšanu vai barotnē trūkst barības vielu, šūnas ir jākultivē vai jāsaglabā tā, lai šūnu dzīvotspēja paliktu nemainīga.

Šūnu saglabāšana ir svarīgs solis dzīvnieku šūnu kultūrā un tās uzturēšanā, kas atšķiras no baktēriju un sēnīšu saglabāšanas. Visefektīvākā dzīvnieku šūnu kultūras saglabāšanas metode ir kriokonservēšana, ko veic ar piemērotu kriogēno līdzekli vai šķidro slāpekli. Šūnu līniju uzturēšana ir sarežģīta lēnā augšanas ātruma un zemā izdzīvošanas līmeņa dēļ. Tāpēc būtiska ir piemērota kriokonservācijas metode, kas var noteikt augstu šūnu dzīvotspēju (apmēram vairāk nekā 90%). Īsumā, kriokonservēšana ietver lēnu šūnu temperatūras pazemināšanu līdz -30 līdz -60 °C, kam seko ātra sasaldēšana līdz mazāk nekā -130 °C. Principā, šūnām sasniedzot īpaši zemu temperatūru, noārdošie enzīmi (proteāzes un fosfatāzes) kļūst neefektīvi, izraisot bioloģiskās inerces stāvokli. Ir vairāki faktori, kas būtiski ietekmē saglabāto šūnu līniju dzīvotspēju:

  1. a) Augšanas apstākļi šūnu atveseļošanās laikā
  2. b) Saglabāto šūnu fizioloģiskais stāvoklis
  3. c) Šūnu blīvums saglabāšanas laikā
  4. d) Krioprotektora veids
  5. e) Sasaldēšanas tehnika

Ideāls šūnu saglabāšanas laiks ir no vēlīnas logaritmiskās līdz agrīnai stacionārai fāzei, kas nodrošina visaugstākās iespējamās dzīvotspējīgās šūnas. Šūnām jābūt ar lielāku blīvumu, aptuveni 10 6 līdz 10 7 šūnas/ml.

Attēls: Subkultūras vai kriokonservācijas fāzes (pārveidots no Freshney RI, 2010)

Izšķiroša nozīme ir arī piemērota krioprotektora izvēlei. Krioaizsargājošie līdzekļi, piemēram, glicerīns vai dimetilsulfoksīds (DMSO), izkliedējas šūnā un palīdz novērst dehidratāciju sasalšanas laikā, daļēji aizstājot intracelulāro ūdeni. DMSO galīgā koncentrācija no 7% līdz 10% ir visizplatītākā krioprotektora izvēle. Glicerīnu izmanto kā krioprotektantu, ja spēcīgiem bipolāriem savienojumiem, piemēram, DMSO, ir nelabvēlīga ietekme uz šūnām, piemēram, HL-60 šūnas diferencējas, pakļaujoties DMSO, kas var negatīvi ietekmēt subkultūras. Kriokonservācijas barotnei vienmēr jābūt tādai pašai kā barotnei, ko izmanto kultūras pavairošanai ar papildu liellopu augļa serumu (maksimums 20%). Seruma proteīni FBS saistās ar toksīniem, kas izdalās no lizētajām šūnām sasaldēšanas vai atkausēšanas procesa laikā. Īkšķa noteikums, kas jāievēro, veicot kriokonservēšanu un turpmāko atveseļošanos, ir lēna sasaldēšana un ātra atkausēšana.

Šūnu sasaldēšanas sistēma no BT laboratorijas sistēmām izmanto lēnas un nemainīgas ātruma sasaldēšanas principu, kas ir ideāli piemērots vairuma zīdītāju kultivēto šūnu līniju kriokonservēšanai un efektīvas augstas šūnu dzīvotspējas uzturēšanai. Sistēma ir lietotājam draudzīga un balstīta uz siltuma pārneses serdi, lai uzturētu zemu termisko masu. Sistēma nodrošina nemainīgu sasalšanas ātrumu -1 grāds minūtē, tāpēc sasalšanas profili dažādos ciklos nemainās. Turklāt sistēmai ir zema termiskā masa, līdz ar to nepaaugstinās vietējā saldētavas temperatūra, pēc tam izvairieties no siltuma izkliedes no jauniem paraugiem uz iepriekš uzglabātajiem paraugiem.

Kā darbināt šūnu sasaldēšanas sistēmu optimālai šūnu kriokonservēšanai:


Kā kontrolēt mikrobu augšanu: 9 labākās metodes

Tālāk minētie punkti izceļ deviņas galvenās metodes, ko izmanto mikrobu augšanas kontrolei. Metodes ir: 1. Sterilizācija ar karstumu 2. Sterilizācija ar sausu karstumu 3. Sterilizācija ar mitru karstumu 4. Tvaika zem spiediena: Autoklāvs 5. Tindalizācija (frakcionēta sterilizācija) 6. Pasterizācija 7. Sterilizācija ar filtrēšanu 8. Sterilizācija ar 9. Ķimikālijas.

Mikrobu augšanas kontrole: 1. metode.

Sterilizācija ar karstumu:

Siltums ir visplašāk izmantotais nāvējošs līdzeklis sterilizācijas nolūkiem. Izstrādājumus var sterilizēt ar sausu karstumu, karsta gaisa krāsni vai mitru karstumu, ko nodrošina tvaiks. Mitrs siltums ir visefektīvākais un efektīvākais. Tas nogalina mikroorganismus, koagulējot un denaturējot to fermentus un olbaltumvielas, kas ļoti palīdz ar ūdens klātbūtni.

Sporas tiek iznīcinātas, pakļaujot tām mitru karstumu 121°C temperatūrā 10-30 minūtes. Sausais karstums nogalina mikroorganismus, oksidatīvi iznīcinot šūnu sastāvdaļas. Sporas tiek iznīcinātas, pakļaujot tām sausu karstumu 160°C temperatūrā 1-2 stundas.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 2.

Sterilizācija ar sausu karstumu:

Sausais karstums ir stikla izstrādājumi vai cits karstumizturīgs ciets materiāls, ko izmanto daudzu priekšmetu/izstrādājumu sterilizēšanai bez ūdens. Sterilizējamos priekšmetus ievieto cepeškrāsnī 160 līdz 170°C uz 2 līdz 3 stundām. Acīmredzot mikrobu nāve rodas šūnu sastāvdaļu oksidēšanās un olbaltumvielu denaturācijas dēļ.

Sausā gaisa siltums ir mazāk efektīvs nekā mitrs. Clostridium botulinum sporas iznīcina 5 minūtēs 121 ° C temperatūrā mitrā karstumā, bet tikai pēc 2 stundām 160 ° C temperatūrā ar sausu karstumu.

Tas nerūsē stikla traukus un metāla instrumentus, kā to dara mitrs karstums, un to var izmantot pulveru, eļļu un līdzīgu priekšmetu sterilizēšanai. Lielākā daļa laboratoriju sterilizē stiklu, petrīdus un pipetes ar sausu karstumu. Neskatoties uz iepriekšminētajām priekšrocībām, sterilizācija ar sauso karstumu ir lēna un nav piemērota karstumjutīgiem materiāliem, piemēram, daudziem plastmasas un gumijas priekšmetiem.

(I) Karstā gaisa krāsns vai sterilizators:

Karstā gaisa krāsni var izmantot termiskai sterilizācijai, kas tiek kontrolēta ar termostatu. Materiāli, kurus var sterilizēt ar sausu karstumu, ir stikla trauki, piemēram, trauki, pipetes, saliktas stikla šļirces un metāla instrumenti, piemēram, knaibles, skalpeļi 160–180 °C temperatūrā 1,5–3,0 stundas. Tas sterilizē materiālus ar sausu karsēšanu bez gaisa un aizņem ilgāku laiku, salīdzinot ar mitru karstumu.

(II) Sadedzināšana:

Šo procesu izmanto mikroorganismu iznīcināšanai, sadedzinot laboratorijā, kad pārnešanas adata tiek ievadīta Bunsena degļa liesmā. Sadedzināšanu izmanto, lai iznīcinātu līķus, inficētos laboratorijas dzīvniekus un citus injicētos materiālus, kas jāiznīcina.

Ir jāveic īpaši piesardzības pasākumi, lai nodrošinātu, ka izplūdes gāzes neiznes atmosfērā cietās daļiņas, kas satur dzīvotspējīgus mikroorganismus.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 3.

Sterilizācija ar mitru karstumu:

Mikroorganismus un to sporas iznīcina zemākā temperatūrā ar mitru karstuma sterilizāciju nekā sausā karstumā. Tomēr mitru siltumu nevar izmantot, lai iznīcinātu mikroorganismus no ūdensnecaurlaidīgiem materiāliem, piemēram, eļļām un smērvielām, kā arī materiālu žāvēšanai noslēgtos traukos.

Mitru siltumu izmanto barotņu un citu šķidrumu sterilizēšanai, kas nepieciešami ūdens satura saglabāšanai. To var panākt, izmantojot autoklāvu pasterizāciju un tindalizāciju.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 4.

Tvaiks zem spiediena: Autoklāvs:

Mikroorganismus un to sporas iznīcina, izmantojot piesātinātu tvaiku zem spiediena, kas nodrošina temperatūru, kas pārsniedz vārot sasniedzamo (tabula). Turklāt tā priekšrocība ir ātra sildīšana, iespiešanās un mitruma pārpilnība olbaltumvielu koagulācijā.

Apstrāde parasti tiek veikta metāla traukā, kas pazīstams kā autoklāvs, ierīce, kas nedaudz atgādina izdomātu spiediena katlu, ko var piepildīt ar piesātinātu tvaiku un uzturēt vēlamo temperatūru un spiedienu jebkurā laika periodā.

Autoklāvēšana nodrošina mitru siltumu temperatūrā, kas augstāka par 100°C. Daudzas barotnes, šķīdumi, izmestās kultūras un piesārņotais materiāls tiek regulāri sterilizēti ar šo aparātu. Parasti, bet ne vienmēr, autoklāvs tiek darbināts ar spiedienu aptuveni 15 lb/in 2 (pie 121°C).

Darbības laiks ir atkarīgs no sterilizējamā materiāla veida, konteinera veida un tilpuma, piemēram, nelielu šķidruma daudzumu var sterilizēt, pakļaujot tiem 15-20 minūtes, savukārt, ja nepieciešams sterilizēt lielākus tilpumus, apstrādes laiks ir pagarināts.

6.2. attēls. Laboratorijas autoklāva shematiskā diagramma, ko izmanto mikrobu barotnes sterilizēšanai.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 5.

Tindalizācija (frakcionēta sterilizācija):

Šī metode ietver objekta karsēšanu 100 o C temperatūrā trīs dienas pēc kārtas ar inkubācijas periodiem starp tiem. Izturīgas sporas dīgst inkubācijas periodos. Objektus tvaicē 30–45 minūtes katrā no trim secīgām dienām.

Pirmajā reizē veģetatīvās baktēriju šūnas tiek nogalinātas. Izturīgas sporas dīgst inkubācijas periodā vidē nakti, veidojot veģetatīvo formu, kas tiek nogalināta otrajā vai trešajā tvaicēšanas reizē. Šai tehnikai tiek izmantots aparāts, kas pazīstams kā tvaika arod.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 6.

Daudzas vielas, piemēram, piens, krējums un noteikti alkoholiskie dzērieni (alus un vīni tiek pakļauti kontrolētai karsēšanai temperatūrā, kas zemāka par vārīšanās temperatūru, process, kas pazīstams kā pasterizācija, kas nogalina noteikta veida mikroorganismus, bet neiznīcina visus organismus).

Pasterizācija nesterilizē dzērienu, pienu un krējumu, bet nogalina visus tajā esošos patogēnus un krasi palēnina bojāšanos, samazinot nepatogēno mikroorganismu līmeni. 6.1. tabulā parādīts ieteicamais siltuma lietojums, lai kontrolētu baktēriju augšanu.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 7.

Sterilizācija ar filtrēšanu:

Filtrēšana ir process, lai samazinātu mikrobu populāciju šķīdumā. Standarta bakterioloģiskie membrānfiltri sastāv no porainas membrānas un sastāv no celulozes acetāta, celulozes nitrāta, polikarbonāta vai cita sintētiska materiāla ar porām.

Lai noņemtu lielāko daļu veģetatīvo šūnu, bet ne vīrusus no šķīduma, izmanto membrānu ar poru izmēru aptuveni 0,2 µm. Šos filtrus izmanto, lai sterilizētu medikamentus, oftalmoloģiskos šķīdumus, barotnes, eļļas, antibiotikas un citus karstumjutīgus šķīdumus.

Mikroorganismus, piemēram, baktērijas, aļģes, raugu un pelējuma sēnītes, var atdalīt no šķidrumiem, bet vīrusus un mikoplazmas nevar izvadīt. Nekad nav iespējams, ka filtrēšanas procedūra, kas padara šķīdumu brīvu no baktērijām, būs bez vīrusiem.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 8.

Enerģiju, kas tiek pārraidīta caur telpu dažādos veidos, sauc par starojumu. UV starojums un jonizējošais starojums ir vissvarīgākais, lai sterilizētu vai dezinficētu priekšmetus.

Ultravioletais starojums ap 2650 Å ir diezgan nāvējošs, bet ļoti efektīvi neiekļūst stiklā, netīrumu plēvēs, ūdenī un citās vielām. Ir pieejamas daudzas lampas, kas izstaro augstu ultravioletās gaismas koncentrāciju visefektīvākajā reģionā no 2600 līdz 2700 Å. Tos izmanto ultra virsmu, piemēram, inokulācijas kameru, dezinfekcijai pēc tīrīšanas ar dezinfekcijas līdzekļiem.

UV starojums ir kaitīgs cilvēcei, sadedzina ādu un bojā acis. Cilvēkiem, kas strādā šādā zonā, jābūt pārliecinātiem, ka UV lampas ir izslēgtas, kad šī zona tiek izmantota. Ultravioletā starojuma pielietojums ir veikts, apstarojot gaisu ar viļņa garumu 2650 Å, kas ir mikrobicīds, bet ne tik kairinošs. UV stari darbojas, inducējot tiimīna dimērus DNS un traucējot organisma DNS replikāciju.

Jonizējošais starojums ir lielisks sterilizējošs līdzeklis un dziļi iekļūst objektos. Tas iznīcinās gan prokariotu, gan eikariotu baktēriju endosporas un veģetatīvās šūnas. Gamma starojums no radioaktīvā elementa Cobalt-60 avota tiek izmantots antibiotiku, hormonu un plastmasas vienreizējās lietošanas piederumu, piemēram, šļirču, sterilizēšanai. To izmanto arī gaļas un citu pārtikas produktu sterilizēšanai un pasterizēšanai.

Mikrobu augšanas kontrole: Metode Nr. 9.

Sterilizācija ar ķīmiskām vielām:

Dezinfekcijas antisepsi izmanto ķīmiskos līdzekļus. Ķīmiskos līdzekļus izmanto, lai novērstu mikrobu augšanu pārtikā, un noteiktas ķīmiskas vielas lieto infekcijas slimību ārstēšanai.

Dezinfekcijas līdzekli izmanto, lai atbrīvotu vielu no infekcijām, un tas parasti ir ķīmisks līdzeklis, kas iznīcina slimību mikrobus vai citus kaitīgus mikroorganismus vai inaktivē vīrusus, piemēram, 95% etanola ir baktericīdi un 0,1% HgCI.2 Šķīdumu izmanto virsmas sterilizācijai.

1. Etilēna oksīds:

(ETO) ir viens no visbiežāk izmantotajiem ķīmiskās sterilizācijas veidiem. Sakarā ar zemo viršanas temperatūru 10,4°C pie atmosfēras spiediena ETO istabas temperatūrā uzvedas kā gāze. Tas ķīmiski reaģē ar aminoskābēm, olbaltumvielām un DNS, lai novērstu mikrobu vairošanos.

ETO izmanto celulozes un plastmasas apstarošanai, un to var izmantot plašam plastmasu klāstam (piem., Petridishes, pipetes, šļirces un medicīnas ierīces utt.) un citiem materiāliem, neietekmējot to integritāti.

Etilēnoksīds (C2H4O) tomēr jāizmanto īpašos gadījumos, jo gāze ir sprādzienbīstama un toksiska cilvēkiem. Tas ir izmantots vīrusu, baktēriju, sēnīšu šūnu utt. dezinfekcijai. Tomēr tas ir noderīgs pielietojums medicīnas mikrobioloģijā, jo tiek izmantots arī ķīmisko respiratoru un vairāku citu medicīnisko iekārtu dezinfekcijai.

2. Ozona sterilizācija:

To izmanto kā ūdens un pārtikas dezinfekcijas līdzekli. ASV daudzas pašvaldības izmanto ozona tehnoloģiju, lai attīrītu ūdeni un notekūdeņus. O3 izmanto gan gāzveida, gan šķidrā veidā kā pretmikrobu līdzekli pārtikas, tostarp gaļas, mājputnu un olu, apstrādē, uzglabāšanā un pārstrādē.

3. Zemas temperatūras gāzes plazma:

(LTGP) tiek izmantots kā alternatīva etilēnoksīdam. Tas izmanto nelielu daudzumu šķidrā ūdeņraža peroksīda (H2O2), kas ar radiofrekvenču viļņiem tiek darbināts gāzes plazmā. Tas noved pie brīvo radikāļu un citu ķīmisko vielu veidošanās, kas iznīcina organismus.

BPL nogalina arī dažādas baktērijas un sēnītes. To lieto gāzveida veidā (20°C kļūst šķidrs), šķidrā veidā var sterilizēt serumus un vakcīnas.

Tomēr jāņem vērā, ka dezinfekcijas līdzekļus un antiseptiskos līdzekļus izšķir pēc tā, vai tie ir droši lietošanai uz gļotādas, un drošība bieži ir atkarīga no savienojuma koncentrācijas.


Vispārīgi

Raksturlielumi

Informācijas apstrāde

  1. Pārbaudiet, vai visos konteineros nav noplūdes vai bojājumi.
  2. Izņemiet sasalušās šūnas no sausā ledus iepakojuma un nekavējoties novietojiet šūnas temperatūrā, kas zemāka par -130&°C, vēlams šķidrā slāpekļa tvaikos, līdz tās ir gatavas lietošanai.

Apstrādes procedūra Lai nodrošinātu visaugstāko dzīvotspējas līmeni, atkausējiet flakonu un sāciet kultivēšanu pēc iespējas ātrāk pēc saņemšanas. Ja pēc ierašanās ir nepieciešama turpmāka sasaldētās kultūras uzglabāšana, tā jāuzglabā šķidrā slāpekļa tvaiku fāzē, nevis -70°C. Uzglabāšana -70 un grādu temperatūrā izraisīs dzīvotspējas zudumu.

  1. Atkausējiet flakonu, viegli maisot 37°C ūdens vannā. Lai samazinātu piesārņojuma iespējamību, neļaujiet O veida gredzenam un vāciņam nonākt ūdenī. Atkausēšanai jābūt ātrai (apmēram 2 minūtes).
  2. Izņemiet flakonu no ūdens vannas, tiklīdz tā saturs ir atkausēts, un dekontaminējiet, iemērcot vai apsmidzinot ar 70% etanolu. Visas darbības, sākot no šī brīža, jāveic stingri aseptiskos apstākļos.
  3. Pārnesiet flakona saturu centrifūgas mēģenē, kurā ir 9,0 ml pilnīgas barotnes, un grieziet ar ātrumu aptuveni 125 x g 5 līdz 7 minūtes.
  4. Atkārtoti suspendējiet šūnu nogulsnes ar ieteicamo pilno barotni (skatīt konkrētās sērijas informāciju par ieteicamo kultūru atšķaidīšanas attiecību) un izdaliet 25 cm 2 vai 75 cm 2 kultivēšanas kolbā. Šūnu atveseļošanās laikā ir svarīgi izvairīties no pārmērīgas barotnes sārmainības. Ieteicams pirms flakona satura pievienošanas kultivēšanas trauku, kurā ir visa augšanas barotne, ievietot inkubatorā vismaz uz 15 minūtēm, lai ļautu barotnei sasniegt savu normālo pH (7,0 līdz 7,6).
  5. Inkubējiet kultūru 37°C temperatūrā piemērotā inkubatorā. 5% CO2 gaisa atmosfērā, ja tiek izmantota šajā produkta lapā aprakstītā barotne.

Kvalitātes kontroles specifikācijas

Vēsture

Juridiskās atrunas

Prece tiek nodrošināta tāda, kāda tā ir, un ATCC ® produktu dzīvotspēja tiek garantēta 30 dienas no nosūtīšanas datuma, ja klients ir uzglabājis un rīkojies ar produktu atbilstoši informācijai, kas iekļauta produkta informācijas lapā, tīmekļa vietnē un Analīzes sertifikāts. Dzīvām kultūrām ATCC uzskaita barotnes sastāvu un reaģentus, kas ir atzīti par efektīviem produktam. Lai gan arī citas nenoteiktas barotnes un reaģenti var dot apmierinošus rezultātus, izmaiņas ATCC un/vai noguldītāja ieteiktajos protokolos var ietekmēt produkta atjaunošanos, augšanu un/vai darbību. Ja tiek izmantots alternatīvs barotnes sastāvs vai reaģents, ATCC dzīvotspējas garantija vairs nav spēkā. Izņemot šeit skaidri norādītos gadījumus, netiek sniegtas nekādas citas garantijas, tiešas vai netiešas, tostarp, bet ne tikai, jebkādas netiešas garantijas par piemērotību tirdzniecībai, piemērotību noteiktam mērķim, ražošanu saskaņā ar cGMP standartiem, tipiskumu, drošību, precizitāti. , un/vai nepārkāpšanu.

Šis produkts ir paredzēts lietošanai tikai laboratorijas pētījumos. Tas nav paredzēts nekādam dzīvnieku vai cilvēku ārstnieciskai lietošanai, lietošanai pārtikā vai dzīvnieku pārtikā vai diagnostikas vajadzībām. Jebkura plānotā komerciālā izmantošana ir aizliegta bez ATCC licences.

Lai gan ATCC pieliek saprātīgas pūles, lai šajā izstrādājuma lapā iekļautu precīzu un atjauninātu informāciju, ATCC negarantē vai neapgalvo par tās precizitāti. Zinātniskās literatūras un patentu citāti ir sniegti tikai informatīviem nolūkiem. ATCC negarantē, ka šāda informācija ir apstiprināta kā precīza vai pilnīga, un klients ir pilnībā atbildīgs par šādas informācijas precizitātes un pilnīguma apstiprināšanu.

Šis produkts tiek nosūtīts ar nosacījumu, ka klients ir atbildīgs un uzņemas visu risku un atbildību saistībā ar ATCC produkta saņemšanu, apstrādi, uzglabāšanu, iznīcināšanu un lietošanu, tostarp bez ierobežojumiem veicot visus atbilstošos drošības un apstrādes piesardzības pasākumus, lai mazinātu veselību. vai vides risku. Kā nosacījumu materiāla saņemšanai klients piekrīt, ka visas darbības, kas veiktas ar ATCC produktu un jebkādiem pēcnācējiem vai modifikācijām, tiks veiktas saskaņā ar visiem piemērojamajiem likumiem, noteikumiem un vadlīnijām. Šis produkts tiek nodrošināts “TĀDS, KĀDS IR” bez jebkādiem apliecinājumiem vai garantijām, izņemot šeit skaidri norādītos gadījumus, un ATCC, tā mātesuzņēmumi, meitasuzņēmumi, direktori, amatpersonas, aģenti, darbinieki, pilnvarotie, pēcteči un saistītie uzņēmumi nekādā gadījumā nav atbildīgi par netiešām darbībām. , īpašiem, nejaušiem vai izrietošiem jebkāda veida bojājumiem, kas saistīti ar produkta lietošanu vai no klienta puses. Lai gan tiek pieliktas saprātīgas pūles, lai nodrošinātu deponēto materiālu autentiskumu un uzticamību, ATCC nav atbildīgs par zaudējumiem, kas radušies šādu materiālu nepareizas identifikācijas vai nepatiesas informācijas sniegšanas dēļ.


Rezultāti

Apoptotisko DNS fragmentāciju izraisa gan DTT, gan H2O2 bet dažādos laika skalos

HL-60 šūnu pakļaušana DTT vai H iedarbībai2O2 izraisīja no laika atkarīgu apoptotisku šūnu nāvi, kā noteikts ar DNS fragmentācijas testu (1.A attēls). Šajos eksperimentos tika izmantota 2 mM DTT koncentrācija, jo tā inducē augstāko apoptozes līmeni šajā šūnu līnijā (Tartier un citi, sagatavošanā). Apoptotiskās DNS kāpnes tiek vizualizētas agarozes gēlos ar etīdija bromīdu (1B, C attēls). DNS fragmentācija ievērojami palielinājās pēc 2 stundām un bija maksimāla 4–5 stundas pēc apstrādes ar H2O2 (100 μM). Izmantojot DTT (2 mM), DNS sadrumstalotība sākas 2–3 h un ir maksimālā 5–6 h pēc DTT iedarbības sākuma. Tādējādi DTT izraisītā apoptoze tiek aizkavēta par 1–2 stundām salīdzinājumā ar to, ko izraisa H2O2. DNS fragmentāciju izraisa samazināta DTT forma, jo apstrāde ar oksidētu DTT neizraisa DNS fragmentāciju (dati nav parādīti).

Apoptotiskā DNS fragmentācija HL-60 šūnās, kas apstrādātas ar DTT vai H2O2. (A) HL-60 šūnas koncentrācijā 5 × 10 5 šūnas/ml tika apstrādātas ar 2 mM DTT (▪) vai 100 μM H2O2(○) 37°C temperatūrā. Zāles tika nomazgātas pēc 2 stundu iedarbības, un šūnas tika atkārtoti inkubētas 37 ° C temperatūrā līdz pārbaudei norādītajā laikā. DNS fragmentācijas procentuālais daudzums tika pārbaudīts, kā aprakstīts sadaļā Materiāli un metodes. Vērtības ir četru eksperimentu vidējās vērtības±standarta kļūdas (S.E.). (B, C) No HL-60 šūnām ekstrahētas DNS agarozes gēla elektroforēze 0 līdz 6 stundas pēc apstrādes ar 2 mM DTT (B) vai 100 μM H2O2 (C)

Ar DTT apstrādātās šūnas uzrāda zemu, bet ilgstošu intracelulārā ūdeņraža peroksīda veidošanos

DCFH-DA pasīvi izkliedējas caur šūnu membrānām, kur acetātu atdala intracelulārās esterāzes, veidojot DCFH. DCFH parasti izmanto, lai noteiktu reaktīvo skābekļa starpproduktu veidošanos. 35,36 Rezultāti, kas parādīti 2.A attēlā, liecina, ka šūnās, kas apstrādātas ar 2 mM DTT, sāk parādīties ROS veidošanās 5 minūšu laikā pēc zāļu pievienošanas, ROS veidošanās parādās maksimāli 15 minūtēs, pēc tam rašanās samazinās līdz kontrolei, neapstrādāts līmenis 2 h. Salīdzinājumam, šūnas, kas apstrādātas ar H2O2 parādīt maksimālo DCF fluorescenci agrākajā izmērāmajā laika punktā, pēc tam nosakāms ROS samazinājums ar laiku, lai sasniegtu kontroles līmeni aptuveni 1 stundā (2.B attēls). Turklāt, lai gan H2O2- apstrādātās šūnas sasniedz tādu pašu maksimālo ROS līmeni kā ar menadionu apstrādātās šūnas, ar DTT apstrādātās šūnas nekad nesasniedz šo maksimālo ROS līmeni. Šie dati liecina, ka DTT ražo ROS lēnāk nekā tad, ja tiek ievadīts H2O2 tiek pievienots šūnām, un tas atbilst mūsu iepriekšējiem datiem, kas parāda, ka DTT oksidācijas (t.i., H ražošanas) pussabrukšanas periods2O2) ir aptuveni 1,3 h vidē 29 un nedaudz mazāk par stundu šūnu klātbūtnē (turēts un citi, nav publicēts).

Intracelulārais ūdeņraža peroksīds, kas mērīts, izmantojot DCFH-DA HL-60 šūnās, kas apstrādātas ar 2 mM DTT (A) vai 100 μM H2O2 (B) dažādiem laikiem. Pozitīvā kontrole ir šūnas, kas 15 minūtes apstrādātas ar 1 mM menadionu (A). DCFH-DA tika pievienots šūnām 30 minūtes pirms analīzes ar plūsmas citometriju. Parādītais rezultāts ir tipisks trīs eksperimentu atkārtojumiem

DTT izraisīta apoptotiskā DNS fragmentācija netiek novērsta, noņemot H2O2 izmantojot katalāzi vai piruvātu

Katalāze fermentatīvi reaģē ar H2O2 lai ražotu ūdeni, bet eksogēni pievienotā katalāze nespēj iekļūt lielākajā daļā šūnu tipu. Piruvāts ātri reaģē ar H2O2 un var darboties gan intracelulāri, gan ārpusšūnu. 37 Dati 1. tabulā parāda, ka DTT izraisīta apoptoze netiek novērsta, noņemot H.2O2 ar katalāzes vai piruvāta palīdzību, lai gan abi līdzekļi novērš apoptotisku DNS fragmentāciju, ko izraisa H2O2. Šāds rezultāts liek domāt, ka, lai gan DTT spēj ģenerēt H2O2 intracelulāri (2.A attēls), H2O2 nav atbildīgs par DTT izraisīto apoptozi.

DTT izraisītai apoptozei ir nepieciešama kaspāzes 3 aktivizēšana

Tā sauktā "izpildītāja" kaspāzes 3 proteīna apstrāde aktīvajā formā un sekojoša dažādu substrātu šķelšanās ar aktīvās kaspāzes 3 palīdzību ir saistīta ar apoptozi, ko izraisa plašs aģentu klāsts. 6, 7, 10 Tāpēc ar DTT apstrādātajās šūnās tika mērīta gan kaspāzes apstrāde, gan kaspāzes aktivitāte, pirmā ar prokaspāzes šķelšanās Western blot analīzi un vēlāk, pārbaudot kaspāžu spēju šķelt dabiskos vai sintētiskos fluorescējošo peptīdu substrātus.

Kaspāzes 3 šķelšanās 19 un 17 kDa produktos ir redzama pēc 2 stundu ilgas DTT apstrādes (3.A attēls). 17 un 11 kDa fragmenti (pēdējo neatpazīst izmantotā antiviela) ir kaspāzes 3 aktīvās apakšvienības. 10,15,38,39 Aktivētās kaspāzes 3 spēja šķelt dabisko substrātu DFF-45/ICAD (3.B attēls) un īpašais sintētiskais substrāts z-DEVD-AFC (3.C attēls). Abu substrātu šķelšanās bija nosakāma 1–2 stundas pēc DTT apstrādes sākuma, un maksimālā aktivitāte ar fluorescējošu substrātu, aptuveni 0,7 nmol AFC šķelšanās stundā/106 ​​šūnās, tika sasniegta pēc 4–5 stundām (3.C attēls). Dabiskā substrāta DFF-45/ICAD šķelšanās ir raksturīga kaspāzes 3 līdzīgai aktivitātei, jo z-DEVD-cmk, kas ir neatgriezenisks kaspāzes 3 inhibitors, pievienošana novērš tās šķelšanos (3.B attēls). Pēc šķelšanās DFF-45/ICAD atbrīvo proteīnu DFF-40, kas pazīstams arī kā Caspase Activated DNase (CAD), kas ir atbildīgs par vismaz daļu no apoptotiskās DNS fragmentācijas24, piemēram, 1. attēlā. 40,41

Kaspāzes 3 aktivitāte pēc 2 mM DTT apstrādes. (A) Prokaspāzes 3 (p32) Western blot, kas apstrādāts līdz tā aktīvajiem peptīdiem p19 un p17. (B) Western blot DFF-45/ICAD, kas ir 3. dabiskais substrāts. Pēdējā josla atbilst 6 h DTT apstrādei plus 200 μM z-DEVD-cmk, kaspāzes 3 inhibitors. (C) Kaspāzes aktivitātes mērītas kā fluorescējošā peptīda-AFC šķelšanās: z-DEVD-AFC kaspāzei 3 (•), z-VDVAD-AFC kaspāzei 2 (▪), z-LEHD-AFC kaspāzei 9 (X) un Ac-IETD-AFC kaspāzei 8 (▴). Vērtības ir vidēji±S.E. no četriem eksperimentiem. T = 0 ir šūnu ekstrakts bez DTT apstrādes. Ņemiet vērā, ka DTT (5 mM), kas iekļauts kaspāzes reakcijas buferšķīdumā, nespēj aktivizēt kaspāzes kontroles paraugos.

Kaspāzēm 2, 8, 9 un 1 ir neliela loma, ja tāda ir, DTT izraisītā apoptozē

Parasti, lai kaspāze 3 tiktu aktivizēta, tā ir jāapstrādā ar citām kaspāzēm vai proteāzēm. Tāpēc mēs pēc tam pētījām iespējamo iesaistīšanos tiola izraisītā kaspāžu 2, 8, 9 un 1/4 apoptozē, kuras visas citos apstākļos aktivizē kaspāzi 3. 6,15 Vispirms tika pētīta neatgriezenisku šūnu caurlaidības kaspāzes inhibitoru iedarbība. Tika pārbaudīti attiecīgi 3., 9. un 1/4 kaspāžu inhibitori z-DEVD-cmk, z-LEHD-fmk un Ac-YVAD-cmk, kā arī pan-kaspāzes inhibitors z-VAD-fmk (4. attēls). ). DTT izraisīto DNS fragmentāciju ievērojami samazina z-VAD-fmk (3,5-kārtīgs samazinājums pie 50 μM kopējās inhibīcijas ar 100 μM – dati nav parādīti), bet to tikai daļēji samazina z-DEVD-cmk (divkārtīgs samazinājums pie 200 μM ). Tas atbilst daļējai PARP šķelšanās samazinājumam ar z-DEVD-cmk (dati nav parādīti). No otras puses, z-DEVD-cmk novērš DFF-45 šķelšanos (3.B attēls). z-VAD-fmk arī pilnībā novērš DFF-45 šķelšanos, bet tikai daļēji novērš PARP šķelšanos (dati nav parādīti). Dati 4A attēlā, kas parāda tikai daļēju aizsardzību ar z-DEVD-cmk, kopā ar PARP šķelšanās novērojumiem liecina, ka proteāze papildus kaspāzei 3 ir iesaistīta tiola izraisītajā ceļā. Inhibitori Ac-YVAD-cmk un z-LEHD-fmk nespēj inhibēt DNS fragmentāciju, ko izraisa DTT apstrāde, norādot, ka kaspāzes 1/4 un 9 nav iesaistītas šajā ceļā. Tomēr tika novērota zema kaspāzes 9 šķelšanās aktivitāte pret tās sintētisko substrātu (3.C attēls). Šķelšanās sākās 4 stundas pēc apstrādes un sasniedza maksimālo aktivitāti (apmēram 0,1 nmols AFC/h/106 šūnas) pēc 5 stundām.

Kaspāzes inhibitoru ietekme uz DTT- un H2O2- inducēta apoptoze. HL-60 šūnas tika iepriekš apstrādātas ar norādīto daudzumu kaspāzes inhibitora 1 stundu, un pēc tam šūnas tika apstrādātas ar 2 mM DTT (A) vai 100 μM H2O2 (B) 2 stundas ar testu 4 stundas pēc aģenta noņemšanas. Vērtības ir vidēji±S.E. no 3–4 eksperimentiem. Inhibitori paši par sevi būtiski neietekmē šūnas (izņemot z-LEHD-fmk, kas izraisa 10% apoptozi)

Atšķirībā no ievērojamās aizsardzības pret DTT izraisītu apoptozi, ko nodrošina z-DEVD-cmk (4.A attēls), šis kaspāzes 3 inhibitors neietekmē H.2O2-inducēta apoptoze (4.B attēls). Turklāt, lai gan kaspāzes 9 inhibitors z-LEHD-fmk neietekmē DTT izraisītu apoptozi, tas samazina H2O2-izraisīta apoptoze aptuveni 25% (4.B attēls). Šie novērojumi liecina, ka vismaz daļēji dažādu kaspāžu relatīvā nozīme DTT un H izraisītajā apoptozē ir atšķirīga.2O2.

2. un 8. kaspāžu lomas tika novērtētas, novērojot to sintētisko substrātu šķelšanās kinētiku (3.C attēls). Abu kaspāžu aktivitāte palielinās 3–4 h pēc DTT terapijas sākuma, maksimālā aktivitāte tiek sasniegta pēc 5 stundām (apmēram 0,2 nmol AFC/h/10 6 šūnas). Tādējādi šis pieaugums notiek vēlāk nekā kaspāzes 3 aktivitātes pieaugums. Kaspāzei 8 šī vēlīnā aktivācija tika apstiprināta ar Western blot, kas parāda, ka ievērojama prokaspāzes 8 šķelšanās ir redzama tikai pēc 4 un 6 h DTT apstrādes (5.A attēls), krietni pēc kaspāzes 3 aktivizācijas. Z pievienošana -DEVD-cmk, inhibitors, kas selektīvs pret kaspāzi 3, ar DTT apstrādātām šūnām izraisa ievērojamu prokaspāzes 8 šķelšanās samazināšanos (5.B attēls). Šis atklājums kopā ar lēno un nelielo kaspāzes 8 aktivāciju salīdzinājumā ar kaspāzes 3 (3.C attēls) liecina, ka kaspāze 8 ir aktivizēta lejpus kaspāzes 3. Kopumā dati liecina, ka kaspāzes 2, 8, 9 un 1/4 nav labi kandidāti, kas atrodas augšpus kaspāzes 3, bet tie tiek aktivizēti vēlāk tiola izraisītā apoptotiskā procesā kā daļa no atgriezeniskās saites cilpas, lai pastiprinātu apoptozes signālu. Šī aktivizēšana notiek laikā, kad šūnās jau notiek plaša DNS fragmentācija (1.A attēls).

Prokaspāzes-8 apstrāde. (A) Prokaspāzes-8 Western blot (p55) pēc norādītajiem DTT apstrādes laikiem. Kaspāzes 8 aktivācija tiek uzskatīta par joslas zudumu pie 55 kDa (proforma). (B) Kaspāzes 3 aktivācijas inhibitora ietekme uz DTT izraisītu procaspāzes 8 apstrādi. Šūnas tika apstrādātas ar 2 mM DTT±200 μM z-DEVD-cmk 6 stundas. Kaspāzes-8 aktivācija netiek novērota, ja kaspāze 3 ir inhibēta

DTT izraisītā apoptoze neietver mitohondriju signalizāciju

Šķiet, ka mitohondriju caurlaidības pārejas (PT) poru atvēršana ir izplatīts notikums apoptozē, ko izraisa vairāki stimuli, kas izraisa oksidatīvo stresu, piemēram, ūdeņraža peroksīds vai t-butilhidroperoksīds. 32,42 Ir pierādīts, ka tad, kad notiek PT, poru atvēršanās un sekojošs mitohondriju transmembrānas potenciāla sabrukums (ΔΨm) veido neatgriezenisku soli, kas noved pie apoptozes. 43,44,45 Mitohondriju citohroms c izdalīšanās var notikt arī pirms ΔΨ kritumam 12,13,20 vai rodas vienlaikus ar PT poru atvēršanu. 46,47 Izmantojot DTT apstrādi, ir neliela un lēna ΔΨ samazināšanāsm (6. attēls), kas seko aptuveni tādam pašam laika gaitai kā apoptotiskajai DNS fragmentācijai šajā šūnu līnijā, sākot no 3 stundām un sasniedzot maksimumu 6 stundas pēc apstrādes (1.A attēls). Turpretim mitohondriju atvienotājs mClCCP izraisa strauju ΔΨ samazināšanosm zemiem līmeņiem. Neliels ΔΨ samazinājumsm DTT izraisītās izmaiņas var atspoguļot tikai nespecifiskas izmaiņas mitohondrijās salīdzinoši vēlā apoptotiskā ceļa laikā. Šāds pieņēmums tiek apstiprināts, pievienojot DTT apstrādātajām šūnām ciklosporīnu A (ciklofilīna D ligands, kas ir PT poru sastāvdaļa, kas, kā zināms, kavē tās atvēršanos). Ciklosporīnam A nav ietekmes uz lēno ΔΨ samazināšanosm ko izraisa DTT (6. attēls).

Mitohondriju transmembrānas potenciāla ΔΨ mērīšanam. Fluorohroma DiOC uzņemšana (procentos no maksimālās kontroles).6(3) HL-60 šūnās, kas apstrādātas ar 2 mM DTT (•) vai 2 mM DTT plus 10 μM CSA (○). Kā pozitīvā kontrole tika izmantota 100 μM mClCCP (▪). DiOC samazināšanās6(3) šūnu uzņemšana liecina par mitohondriju transmembrānas potenciāla traucējumiem ΔΨm. Vērtības ir vidēji±S.E. no 3–6 eksperimentiem

Citohroms c līmenis tika analizēts arī ar Western blot gan DTT vai H citozola, gan mitohondriju frakcijās2O2 apstrādātas šūnas. Rezultāti ar DTT ārstēšanu neuzrāda būtiskas izmaiņas citohromā c līmeņi jebkurā frakcijā (7.A attēls), izņemot nelielu citohroma līmeņa paaugstināšanos citozolā c pēc 6h. Turpretim HL-60 šūnas, kas apstrādātas ar H2O2 demonstrē ātru citohroma uzkrāšanos c citozolā (sākot no 30 minūtēm) ar paralēlu mitohondriju nodalījuma samazināšanos, kur citohroms c kļūst nenosakāms pēc 4–6 stundu ārstēšanas (7.B attēls). Citohroma oksidāze (II apakšvienība) citozola frakcijā netika atklāta, kas liecina, ka preparātos bija nenozīmīgs mitohondriju piesārņojums. Tā kā citozoliskais citohroms c ir neaizstājams kaspāzes 9 aktivācijai 15, 21, šeit novērotais vēlīnā un nelielais citozola palielinājums ir saskaņā ar kaspāzes 9 novēloto aktivāciju, kas novērota, pētot tās fluorescējošā substrāta šķelšanos ar DTT apstrādātajās šūnās (3.C attēls). ). Dati liecina, ka mitohondriju signalizācijai nav lielas nozīmes DTT izraisītā apoptozē, bet šķiet, ka tā drīzāk veicina vēlāk, iespējams, kā daļu no pastiprināšanas mehānisma. Tomēr H2O2 rezultāti liecina, ka HL-60 šūnas aktivizē citohromu c ceļš uz apoptozi agrīnā stadijā, reaģējot uz vismaz dažiem stimuliem.

Citohroms c imūnblotēšana. Citohroms c gan citozola, gan mitohondriju nodalījumu līmenis tika novērtēts pēc dažādiem HL-60 šūnu ekspozīcijas laikiem ar 2 mM DTT (A) vai 100 μM H2O2 (B). Aktīna proteīns tiek izmantots kā slodzes kontrole citozola frakcijā. Citohroma oksidāzes II apakšvienība (COX) tiek izmantota kā mitohondriju slodzes kontrole un kā mitohondriju marķieris. Tā trūkums citozola frakcijā norāda, ka šajā frakcijā nav mitohondriju piesārņojuma


Uzliesmojuma nozīme:


Uzliesmo cilpu : Turot cilpu Bunsen degļa liesmā, tiek iznīcināti visi piesārņojošie organismi, tādējādi sterilizējot cilpu. Cilpai dažas sekundes vajadzētu mirgot karsti. Pēc uzliesmošanas noteikti nedaudz atdzesējiet cilpu, pirms paņemat organismus no inokulāta kultūras (kultūras, kas jāpārnes). Pārnesot kultūru no plāksnes, atdzesējiet cilpu, pieskaroties agara malai. Pārnesot no buljona, karstā cilpa radīs čaukstošu troksni, tiklīdz to ievietosiet kultūrā. Cilpa automātiski atdzisīs, tiklīdz tā nonāks saskarē ar buljona kultūru, taču pagaidiet vienu vai divas sekundes, pirms izņemat cilpu ar inokulātu no mēģenes. (Karstā cilpa var radīt aerosolus, kad tā pieskaras barotnei, kurā ir mikroorganismi. Tas izraisīs buljona un baktēriju īsu viršanas procesu, radot baktērijas saturošu aerosolu. Šīm gaisā esošām baktērijām ir iespēja iekļūt elpceļos vai ķermeņa daļas. Ja, ievietojot termiski sterilizēto cilpu buljona kultūrā, dzirdat svilpojošu skaņu, tas norāda, ka cilpa nav pietiekami atdzesēta).


Mēģenes mutes aizdedzināšana: Caurules mutes izlaišana caur Bunsena degļa liesmu rada konvekcijas strāvu, kas izspiež gaisu no caurules. Tas novērš gaisa piesārņotāju iekļūšanu caurulē. Bunsena degļa siltums arī izraisa gaisa paaugstināšanos ap jūsu darba zonu, samazinot iespēju, ka gaisā esošie mikroorganismi piesārņos jūsu kultūras.


Agars Slants: Kultūras bieži vien tiek pārnestas uz slīpajām agara mēģenēm, papildus buljona caurulēm un agara plāksnēm. Agara slīpums ir mēģene, kas satur agaru, kurā cietais agars veido mēģenē slīpumu. Inokulējot slīpi agaru, ļoti viegli uzvelciet cilpu, kurā ir inokulāts, pa virsmu zigzaga formā, vienlaikus uzmanoties, lai nesalauztu virsmu. Cilpas vietā var izmantot adatu, lai inokulētu slīpu agaru, adatu, kurā ir inokulāts, iedurot agarā (1. attēls).


Ievads

Cilvēka granulocītu anaplazmozi (HGA), kas ir jauna ērču pārnēsāta zoonoze ASV un citās pasaules daļās, izraisa Anaplasma phagocytophilum, gramnegatīva obligāta intracelulāra baktērija (Godman un citi., 1996 Dumler un Bakken, 1998). Galvenā HGA patoģenēzes iezīme ir šī patogēna spēja iekļūt granulocītos un vairoties tajos, kas parasti iznīcina patogēnus. A. phagocytophilum inducē 160-kDa proteīna tirozīna fosforilēšanos, mijiedarbojoties ar saimnieka cilvēka mieloīdām šūnām (Lin un Rikihisa, 2004). Proteīna tirozīna fosforilēšana ir nepieciešama baktēriju iekļūšanai un proliferācijai, kā parādīts, izmantojot plaša spektra tirozīna kināzes inhibitoru (Yoshiie un citi., 2000 Mott un citi., 2002 Lin un Rikihisa, 2003, 2004). Jaunākie pētījumi to parādīja A. phagocytophilum īpaši inducē 160 kDa saimniekšūnu proteīna ROCK1 un 190 kDa baktēriju proteīna AnkA (IJdo) tirozīna fosforilēšanos un citi., 2007 Thomas and Fikrig, 2007).

Cilvēka genoms kodē aptuveni 90 tirozīna kināzes, no kurām 58 ir receptoru tirozīna kināzes un 32 ir citozola tirozīna kināzes (Robinsons un citi., 2000). Kā galvenās pēctranslācijas modifikācijas, kas notiek galvenokārt eikariotos, proteīna tirozīna fosforilēšana spēlē kritisku lomu virknes fundamentālo bioloģisko funkciju regulēšanā, tostarp šūnu aktivācijā, proliferācijā, diferenciācijā un onkoģenēzē (Hubbard un Till, 2000). Ir zināms, ka vairāki baktēriju efektorproteīni, kas pārvietoti saimniekšūnās, izmantojot III tipa sekrēcijas vai IV tipa sekrēcijas (T4S) aparātu, ir tirozīna fosforilēti (Backert and Selbach, 2005). Pēc tirozīna fosforilēšanas šie proteīni nodrošina baktēriju receptorus vai izmaina saimnieka signalizācijas notikumus un spēlē kritisku lomu baktēriju invāzijā un patoģenēzē (Cascales un Christie, 2003 Ghosh, 2004). Ir identificēti gēni, kas kodē VirB/D4 T4S iekārtu A. phagocytophilum un citi obligāti intracelulāri α-proteobaktērijas (Ohaši un citi., 2002 Dannings Hotops un citi., 2006). Viens pētījums parādīja, ka T4S iekārta ir iesaistīta inficēšanā ar A. phagocytophilum saimniekšūnās (Niu un citi., 2006), tomēr T4S tehnikas substrāti nav identificēti.

Šajā pētījumā mēs identificējām 160 kDa proteīnu, galveno un arvien vairāk tirozīna fosforilēto proteīnu infekcijas laikā. A. phagocytophilum (Lin un Rikihisa, 2004), kā A. phagocytophilum AnkA proteīns un pierādīja, ka tas saimniekšūnā mijiedarbojas ar Abi-1, un turklāt, ka Abl-1 un AnkA ir iesaistīti infekcijā. Mūsu rezultāti arī parādīja, ka AnkA ir T4S substrāts.


Diskusija

Mūsu rezultāti liecina, ka I klases PI3K inhibitors GDC-0941 uzlabo ABT-737– mediēto mitohondriju apoptozi AML šūnās. Ir izstrādāti daudzi mazo molekulu inhibitori, lai mērķētu uz PI3K/Akt/mTOR ceļu, kas ir pievilcīgs kandidāts mērķtiecīgai terapijai, daži ir klīniskajos pētījumos, un daži ir apstiprināti vēža terapijai[3]. GDC-0941, kas kā viens līdzeklis galvenokārt inducē G1 šūnu cikla apstāšanās ar minimālu apoptozi, veicināja ABT-737 & #x02013 izraisītu apoptozi ar BAX aktivāciju, kas liecina, ka PI3K / Akt signālu blokāde uzlabo mitohondriju ārējās membrānas caurlaidību ar ABT-737 AML šūnās. Ir zināms, ka BH3 mimētiskā ABT-737 kā atsevišķa līdzekļa efektivitāte ir ierobežota, jo tas cieši saistās ar Bcl-2, Bcl-xL un Bcl-w, bet ne ar Mcl-1[10]. Iepriekšējie ziņojumi liecina, ka augsta Mcl-1 ekspresija veicina rezistenci pret ABT-737 un ka samazināta Mcl-1 ekspresija rada jutību pret ABT-737 [10, 11, 30]. Mcl-1 bloķē citohromu c atbrīvošanās no mitohondrijiem, daļēji heterodimerizējoties ar Bcl-2 saimes BAX proapoptotisko locekli, tādējādi novēršot BAX / BAK aktivāciju un mitohondriju ārējās membrānas caurlaidību un, visbeidzot, saglabājot mitohondriju homeostāzi. Tāpēc stratēģija, kas vērsta uz Mcl-1, ir ļoti svarīga, lai sensibilizētu audzēja šūnas pret ABT-737, tostarp AML [10, 11]. Samazināta Mcl-1 līmeņa saistība ar šķeltās kaspāzes-3 palielināšanos vai šūnu procentuālo daudzumu ar Δψ zudumum un Bax aktivācija apstiprina secinājumu, ka Mcl-1 samazināšana ir cieši saistīta ar apoptozes indukciju. Glikogēna sintāzes kināze-3 (GSK-3), PI3K/Akt signālu pakārtotais mērķis, ko inaktivē Akt, ir saistīta ar Mcl-1 destabilizāciju[31], un zināms, ka mTOR pozitīvi kontrolē Mcl-1 translāciju[ 32]. GDC-0941 un ABT-737 ir sinerģiski kavējuši krūts vēža šūnu augšanu, samazinot Mcl-1 ekspresiju[33]. Šie rezultāti norāda uz iespēju, ka alternatīvi apoptotiskie ceļi, izņemot Mcl-1, ir veicinājuši GDC-0941 un ABT-737 izraisīto apoptozi. Šajā kontekstā nesenais ziņojums parādīja efektīvu Mcl-1 samazināšanos AML šūnās, ārstējot ar dubultu PI3K / mTOR inhibitoru[34], kas liecina par nozīmīgu mTOR signālu ieguldījumu Mcl-1 stabilitātes kontrolē.

Pavisam nesen Spender et al. ziņoja, ka kombinētā PI3K / Akt / mTOR un ABT-737 inhibīcija izraisīja sinerģisku kaspāzes aktivāciju un Bim / Mcl-1 ekspresijas attiecību palielināšanos, kas bija saistīta ar c-Myc ekspresijas zudumu Burkitta limfomas šūnās [7]. Sinerģiskā apoptozes indukcija, kombinējot c-Myc inhibitoru ar ABT-737, liecina, ka c-Myc, PI3K/Akt/mTOR pakārtotais mērķis, veicina rezistenci pret ABT-737[7]. c-Myc ir viens no Stat-5 tiešajiem mērķa gēnu produktiem, kas mijiedarbojas ar Akt/mTOR un ir tieši vērsts uz Bcl-2 un Bcl-xL[6], kā arī kombinēta mērķēšana uz Akt/mTOR, izmantojot rapamicīnu un Bcl. Ir pierādīts, ka -2 un Bcl-xL, izmantojot ABT-737, nomāc no Stat-5 atkarīgu mieloproliferatīvu audzēju izdzīvošanu[35]. Ņemot vērā ierosināto c-Myc nozīmi AML bioloģijā[36], informatīvi var būt turpmāki pētījumi, kas apraksta c-Myc lomu ABT-737 rezistencē.

Šajā pētījumā mēs tālāk pētījām šīs kombinācijas efektivitāti AML šūnās, kas tika kultivētas kopā ar MSC hipoksiskos apstākļos, kas imitē leikēmijas BM mikrovides patoloģiskos apstākļus. Nesen tika ziņots, ka ar matricu saistītās audzēja šūnas ierosina adaptīvu reakciju, kas ietver Bcl-2 antiapoptotisko ģimenes proteīnu Bcl-2 un Bcl-xL regulēšanu, izmantojot no vāciņa neatkarīgu translāciju un FOXO mediētu transkripciju [37]. Savukārt kombinēta Bcl-2 un PI3K/mTOR inhibīcija spēja efektīvi atcelt ar matricu saistīto vēža šūnu rezistenci [37]. Kopkultūra ar MSC veicināja AKT un mTOR pakārtotā mērķa pS6K fosforilāciju AML šūnās, kas atbilst mūsu iepriekšējiem atklājumiem [19]. Lai gan ir ziņots, ka gan Bcl-2, gan Mcl-1 ir inducēti leikēmijas šūnās kopkultūrā ar stromas šūnām [38], mēs nenovērojām izmaiņas šo proteīnu ekspresijas līmeņos. Šīs neatbilstības, iespējams, ir saistītas ar izmantoto stromas šūnu veidu (stromas šūnu līnijas salīdzinājumā ar cilvēka BM iegūtajām stromas šūnām mūsu pētījumā). Neskatoties uz to, mūsu publicētie dati atbilst citu pētījumu rezultātiem un apstiprina novērojumu, ka cilvēka BM iegūtais MSC nodrošina aizsardzību pret tradicionāli lietotiem ķīmijterapijas līdzekļiem [39]. Ir iedomājams, ka stromas izraisīta PI3K / AKT / mTOR ceļa aktivācija veicina rezistenci, izmantojot Bcl-2 ģimenes proteīnu pēctranslācijas modulāciju vai citu apoptotisko spēlētāju transkripcijas modifikāciju, izmantojot FOXO transkripcijas faktoru. Jāatzīmē, ka mēs novērojām labāku AML pacientu BM atvasināto MSC aizsargājošo iedarbību pret GDC-0941/ABT-737, salīdzinot ar parastajiem BM MSC, un šis atklājums prasa turpmākus sistemātiskus pētījumus, izmantojot leikēmijas izraisītas stromas šūnas. Kopumā mūsu dati parāda PI3K un Bcl-2 / Bcl-xL inhibitoru potenciālu izraisīt iespaidīgu AML šūnu augšanas kavēšanu pat stromas kopkultūru aizsargājošos apstākļos.

Mēs esam tālāk izpētījuši hipoksijas ietekmi uz GDC-0941/ABT-737 efektivitāti. Nesenie pētījumi parādīja, ka hipoksija samazināja Mcl-1 regulējumu, izmantojot HIF-1α𠄺tkarīgus vai –neatkarīgus mehānismus no šūnu tipa atkarīgā veidā[18]. Šie atklājumi liecina, ka hipoksija, zināms rezistences faktors, paradoksālā veidā var izraisīt paaugstinātu hipoksisko audzēju šūnu jutību pret BH3 mimētisko ABT-737. Saskaņā ar publicētajiem datiem mēs noskaidrojām, ka hipoksija, stāvoklis, kas izplatīts leikēmijas KM gadījumā, samazināja antiapopotiskā Mcl-1 ekspresijas līmeni MOLM-13 un OCI-AML3 šūnās un mainīja rezistenci pret ABT-737 no Mcl-1 atkarīgā gadījumā. OCI-AML3 šūnas. Lai gan Mcl-1 iznīcināšana strauji palielināja OCI-AML3 šūnu jutību pret ABT-737 normoksiskos apstākļos, šūnu kultivēšana hipoksiskā vidē nenotika turpmāka sensibilizācija, norādot, ka Mcl-1 samazināšana ir galvenais paaugstinātas jutības starpnieks. AML šūnu skaits hipoksijas laikā. Lai gan mēs nenovērojām paaugstinātu jutību pret ABT-737 vai ABT-737/GDC-0941 HL-60 un MOLM-13 hipoksiskos apstākļos, farmakoloģiskā mijiedarbība starp diviem mērķa līdzekļiem saglabājās sinerģiska. Šī sinerģija tika saglabāta ar shMcl-1 inficētajā OCI-AML3, norādot uz papildu mehānismiem, kas izraisa sensibilizāciju pret šūnu nāvi, kombinējot abus ceļus. Kopumā mūsu rezultāti parādīja, ka, lai gan hipoksija mainīja no Mcl-1 atkarīgo rezistenci pret ABT-737, normoksijas gadījumā GDC-0941/ABT-737 kombinācija bija sinerģiska neatkarīgi no Mcl-1 trokšņa slāpēšanas. Šie atklājumi liecina par citu potenciālu mehānismu ieguldījumu, kas regulē mitohondriju apoptozi, ārstējot ar GDC-0941/ABT-737. Rahmani et al. [34] nesen pierādīja, ka PI3K/Akt inhibīcija palielināja Bim saistīšanos ar Bcl-2/Bcl-xL, ko atcēla ABT-737, savukārt kombinēta PI3K/Akt inhibitora apstrāde ar ABT-737 samazināja Bax/Bak saistīšanos ar Mcl- 1, Bcl-2, Bcl-xL. Šie atklājumi liecina, ka GDC-0941/ABT-737 kombinācijas izraisītā apoptozes indukcija ir daudzfaktoru process, kas ietver Bim atbrīvošanu no Bcl-2/Bcl-xL vai Bak/Bax no Mcl-1/Bcl-2/Bcl-xL kompleksiem. papildus Mcl-1 pazemināšanai, kas galu galā izraisa apoptozes indukciju, izmantojot Bax / Bak aktivāciju.

Kopumā šie atklājumi liecina, ka 1) augsta Mcl-1 ekspresija ne vienmēr nozīmē rezistenci pret ABT-737 AML blastos, kas atrodas BM mikrovides hipoksiskajos apstākļos. 2) Bcl-2 un PI3K ceļu dubultā kavēšana kavē AML šūnu izdzīvošanu. sinerģiskā veidā un var būt īpaši piemērojams leikēmijas BM mikrovides patoloģiskajos apstākļos, kā mēs esam pierādījuši, ka tas veicina rezistenci pret citotoksiskiem ķīmijterapijas līdzekļiem.

Rezumējot, vienlaicīga PI3K un antiapoptotisko Bcl-2 ģimenes proteīnu inhibīcija prasa turpmāku izpēti kā pievilcīgu terapeitisko modalitāti AML, kas spēj pārvarēt specifiskus ar matricu saistītu un hipoksijas izraisītu AML šūnu izdzīvošanas mehānismus BM mikrovidē.


Skatīties video: Mitrzeme - risinājums lauksaimniecības piesārņojuma samazināšanai (Decembris 2022).